1、Western blot实验技巧之蛋白样品制备、SDS-PAGE胶制备、跑电泳、转膜、孵育抗体、显影和ImageJ分析(来自一位可稳定重复WB结果的科研狗之四年经验总结) 2、“玄学”实验-Western blot的内参你选对了吗? 3、SDS-PAGE凝胶制备技巧,易翻车点及其解决方法汇总(五年经验结晶) 4、石蜡切片和冰冻切片之高质量HE染色、...
因此，SDS-PAGE和Western blot虽然都涉及到SDS和聚丙烯酰胺凝胶，但它们在应用上有明显区别。SDS-PAGE主要用于蛋白质的分离，而Western blot则侧重于特定蛋白质的检测。两者结合使用可以更全面地分析蛋白质。在SDS-PAGE过程中，蛋白质被赋予相同的电荷密度，使得分子大小成为决定其迁移率的关键因素。而在Weste...
(1)当我们把混合样品通过SDS-PAGE电泳分离之后,理论上可以通过所得条带的分子量来鉴定目的蛋白是否存在,但是这种鉴定受到很多因素的干扰,非常不准确。因此我们需要进一步使用Western blot (蛋白质印迹法)来鉴定血清中的IgG含量的多少。 凝胶上的蛋白质条带 (2)Western blot属于印迹法,是样品经过电泳分离后,转印至膜...
与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺 凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过 PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载 体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不 变。以固相载体上的蛋白质...
https://www.xuetangx.com/learn/sysuP10070118/sysuP10070118/10372101/video/17700782?channel=i.area.manual_search, 视频播放量 520、弹幕量 0、点赞数 13、投硬币枚数 2、收藏人数 28、转发人数 6, 视频作者 分子细胞生化, 作者简介 一个沉迷于生命科学研究的在校生,
三、Western Blot 1.在跑胶过程中,配置好半干转膜液(纯水:无水乙醇:5XTransfer Buffer=3:1:1)和封闭液(脱脂奶粉1.5g+TBST30ml); 2.提前把两块白色厚滤纸泡在转膜液中,另取一个小槽,倒入少许转膜液备用; 3.电泳结束后,拿出带胶的玻璃板放置在桌面上,用工具轻轻撬开玻璃板,根据Marker确定好目的蛋白位置,切...
免疫荧光技术SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）Westernblotting实验技术 一、免疫荧光技术 基本原理：免疫荧光技术是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素，制成荧光抗体，再用这种荧光抗体（或抗原）作为探针检测组织或细胞内的相应抗原（或抗体）。在组织或细胞内形成的抗原抗体复合物上含有标记...
前一个只是把蛋白进行电泳分析，主要用于蛋白纯度分析及分子量分析，主要用于定性；后者则是在前者的基础上又经过了转膜及杂交等步骤，用于分析特定蛋白的表达多少的。
SDS-PAGEWesternBlot SDS-PAGEandWesternBlot •试剂准备•样品准备•含量测定 •SDS-PAGE •转膜•免疫反应•化学发光•凝胶图像分析 SDS-PAGE •十二烷基磺酸钠-聚丙稀酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE，polyacrylamidegelelectrophoresis）•聚丙稀酰胺是由丙稀酰胺（acrylamide）和N,N’-亚甲基双丙稀酰胺（N,N...
最开做印迹的科学家叫Southern,主要研究的是DNA印迹,因此将Southern blot成为DNA印迹;随后相继发现了Northern blot (RNA 印迹)以及western blot (蛋白印迹)。Western blot是一种使用特定抗体来识别凝胶电泳分离的蛋白质的技术。首先应该知晓SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulphate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis)即十二烷基...