1、Western blot实验技巧之蛋白样品制备、SDS-PAGE胶制备、跑电泳、转膜、孵育抗体、显影和ImageJ分析(来自一位可稳定重复WB结果的科研狗之四年经验总结) 2、“玄学”实验-Western blot的内参你选对了吗? 3、SDS-PAGE凝胶制备技巧,易翻车点及其解决方法汇总(五年经验结晶) 4、石蜡切片和冰冻切片之高质量HE染色、...
(1)当我们把混合样品通过SDS-PAGE电泳分离之后,理论上可以通过所得条带的分子量来鉴定目的蛋白是否存在,但是这种鉴定受到很多因素的干扰,非常不准确。因此我们需要进一步使用Western blot (蛋白质印迹法)来鉴定血清中的IgG含量的多少。 凝胶上的蛋白质条带 (2)Western blot属于印迹法,是样品经过电泳分离后,转印至膜...
SDS-PAGEWesternBlot SDS-PAGEandWesternBlot •试剂准备•样品准备•含量测定 •SDS-PAGE •转膜•免疫反应•化学发光•凝胶图像分析 SDS-PAGE •十二烷基磺酸钠-聚丙稀酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE，polyacrylamidegelelectrophoresis）•聚丙稀酰胺是由丙稀酰胺（acrylamide）和N,N’-亚甲基双丙稀酰胺（N,N...
Western blot不仅能够检测特定蛋白质的存在，还能提供关于蛋白质表达水平的信息。因此，SDS-PAGE和Western blot虽然都涉及到SDS和聚丙烯酰胺凝胶，但它们在应用上有明显区别。SDS-PAGE主要用于蛋白质的分离，而Western blot则侧重于特定蛋白质的检测。两者结合使用可以更全面地分析蛋白质。在SDS-PAGE过程中，蛋...
免疫印迹,SDS-PAGE,蛋白定量 三、实验样品信息,试剂、耗材或仪器 材料 1.5mlEP管(康宁生命科学有限公司);15mlEP管(康宁生命科学有限公司);50mlEP管(康宁生命科学有限公司);1000ml量筒;200ml量筒;100ml量筒;10ml量筒;研磨珠、1000ul移液枪(Eppendorf);200ul移液枪(Eppendorf)、100ul移液枪(Eppendorf);20ul移液...
细菌体中含有大量蛋白质,具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用,通过加热使蛋白质解离,大量的SDS结合蛋白质,使其带相同密度的负电荷,在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)上,不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。采用考马斯亮兰快速染色,可及时观察电泳分离效果。因而根据预计表达蛋白的分子量,可筛选...
SDS-PAGE及Western Blot简明操作指南 ⼀．蛋⽩样品制备 推荐使⽤RIPA裂解液。⼀般使⽤强裂解液，对于coIP可⽤弱裂解液。1.准备⼯作：1)取⾜量裂解液，加⼊PMSF和（或）蛋⽩酶抑制剂；若要检测蛋⽩磷酸化，推荐加 ⼊磷酸酶抑制剂。置于冰上预冷。2)准备⾜量PBS，置于冰上预冷。3)提前...
western blot是通过聚丙烯酰胺电泳(SDS PAGE)将蛋白质按照分子量大小分离,再转移到膜上,最后通过一抗、二抗以及显色液对蛋白进行特异性标记的方法。 今天给大家分享一下实验过程中的小细节～ ♥️样品处理细胞样品加入裂解液 - poppy(读博版)于20240529发布在
免疫荧光、SDS-PAGE、Western-blot实验技术 免疫荧光技术SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）Westernblotting实验技术 一、免疫荧光技术 基本原理：免疫荧光技术是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素，制成荧光抗体，再用这种荧光抗体（或抗原）作为探针检测组织或细胞内的相应抗原（或抗体）。在...
SDS-PAGE and Western blot SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳SodiumDodecylSulfatePolyacrylamideGelElectrophoresis(SDS-PAGE)SDS(SodiumDodecylSulfate,十二烷基磺酸钠)磺酸钠•是阴离子去污剂；是阴离子去污剂；•破坏蛋白质分子的二硫键及非共价键，破坏蛋白质分子的二硫键及非共价键，改变其构象为线状分子；...