前一个只是把蛋白进行电泳分析，主要用于蛋白纯度分析及分子量分析，主要用于定性；后者则是在前者的基础上又经过了转膜及杂交等步骤，用于分析特定蛋白的表达多少的。
sds page 胶是用来分离蛋白的,而western blot是用sds page 胶分离蛋白后再转膜,然后用一抗二抗孵育,最后显色,出现蛋白条带的一个检测蛋白的方法。00分享举报
表达蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 一、原理 细菌体中含有大量蛋白质,具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用,通过加热使蛋白质解离,大量的SDS结合蛋白质,使其带相同密度的负电荷,在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)上,不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。采用考马斯亮兰快速染色,可及时观察电泳...
western blot 是检测蛋白是否表达的实验。SDS是十二烷基硫酸钠。page是聚丙烯酰胺啊
免疫荧光、SDS-PAGE、Western-blot实验技术 免疫荧光技术SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）Westernblotting实验技术 一、免疫荧光技术 基本原理：免疫荧光技术是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素，制成荧光抗体，再用这种荧光抗体（或抗原）作为探针检测组织或细胞内的相应抗原（或抗体）。在...
蛋白电泳 SDS-PAGE原理 SDS是一种阴离子表面活性剂,能打断蛋白质的氢键和疏水键,并按一定的比例和蛋白质分子结合成复合物,使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷,掩盖了各种蛋白分子间天然的电荷差异。因此,各种蛋白质-SDS 复合物在电泳时的迁移率,不再受原有电荷和分子形状的影响,而只是棒长的函数。
二、蛋白质印迹免疫分析(Western Blot) 1、蛋白质转膜 (1)取下胶板,小心去除一侧玻璃板,切去浓缩胶和分离胶无样品的部分,将凝胶分成两半,含分子量标准的部分用考马斯亮蓝染色。 (2)精确测量剩余胶的大小,按该尺寸剪取一张硝酸纤维素膜和两张滤纸(BioRad专用),在转移缓冲液中将膜和滤纸浸泡15分钟。
Western Blot检测时,相对广泛采用的是SDS-PAGE。对于SDS-PAGE,是在电泳体系中加入变性剂SDS和还原剂DTT或者巯基乙醇等。蛋白质分子的多聚体或者高级结构会被打开,蛋白质氨基酸侧链和SDS结合形成蛋白-SDS复合物,所带的负电荷大大超过了蛋白质原有的电荷量,因此可以有效消除不同蛋白质分子间的电荷差异和空间结构差异。
检测二抗 二抗 一抗蛋白作为抗原NC膜或PVDF膜 制备凝胶制备蛋白质样品上样SDS-PAGE转印NC膜或PVDF膜与能特异性识别待检蛋白的一抗反应与能特异性识别待检蛋白的一抗反应与标记的二抗反应，与标记的二抗反应，显色或化学发光反应观察、观察、分析结果 湿电转膜仪 半干转膜仪 SDS-PAGE Westernblot ...