• 解决方案：小心取下玻璃板，避免分离，上样时避免枪头插得太深。9. 泳道中心凹陷：• 原因：梳子插入后胶暴露于空气中时间过长。• 解决方案：尽量在 25 分钟内插入梳子，避免长时间暴露。结语 通过详细了解SDS-PAGE凝胶的配制方法及常见问题的解决方案，实验者可以有效提高实验成功率，减少误操作，从而获...
以下是制作SDS-PAGE凝胶的基本配方和制胶步骤: 配方: 1. 1%丙烯酰胺(Acrylamide)溶液:将3.7g丙烯酰胺和60μl N,N'-亚甲基双丙烯酰胺溶解在0.5ml双蒸水中,搅拌均匀。 2. 2.5%BT(Bis-Tris)溶液:将0.1g BT和0.25ml TBE(三酸乙酸盐电泳缓冲液)混合均匀。 3. 10%过硫酸铵(AMS)溶液:将10μl AMS溶解在1...
SDS-PAGE凝胶配方及制胶 12%分离胶 体积 试剂 5ml 8ml 10ml 15ml 25ml 30ml 60ml 90ml 120ml 30%Acr-Bis(ml) 2 3.2 4 6 10 12 24 36 48 1.5M Tris-HCl PH8.8(ml) 1.25 2 2.5 3.75 6.25 7.5 15 22.5 30 ddH2O(ml) 1.65 2.64 3.3 4.95 8.25 9.9 19.8 29.7 39.6 10%SDS(ul) 50 80 100 ...
(参照《分子克隆》二版P884) 0.01 MNaOAc (pH5.2)参照此配方配制。 5×Tris-Glycine Buffer(SDS-PAGE电泳缓冲液) 组分浓度:0.125 M Tris, 1.25 M Glycine, 0.5%(W/V) SDS 1.称量下列试剂置于烧杯中。 2.加入约900 ml去离子水搅拌溶解。 3.定容至1L,室温保存。 (参照《分子克隆》二版P884) Transfer ...
分离胶配方: 浓缩胶配方: 发布于 2024-12-19 15:54・IP 属地山东 生物实验 蛋白电泳 wb实验 打开知乎App 在「我的页」右上角打开扫一扫 其他扫码方式:微信 下载知乎App 开通机构号 无障碍模式 验证码登录 密码登录 中国+86 其他方式登录 未注册手机验证后自动登录,注册即代表同意《知乎协议》《隐私保护指引》...
操作步骤( 1 )在制板支架上置一专用有机玻璃槽,将固定好的玻璃板下部插入槽内,中部用两个文具夹固定在支架竖板上。在槽内倒入已充分溶化的琼脂,冷凝后封闭胶腔底部。( 2 )用直径约 2mm 的聚乙烯管连接好梯度混合器、恒流泵、凝胶模。( 3 ) 30% 胶液的配制取 50ml
1) 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制 SDS-PAGE 的 分离胶<即下层胶>: 1/8 . SDS- 最 PAGE 佳 分离 分 胶浓 离 度 范 围 6%胶 50- 150 kD 8%胶 30- 90k D 2/8 . 10% 胶 12% 胶 15% 胶 20- 80k D 12- 60k D 10- 40k D 成分 配制不同体积 SDS-...
sds-page配方 SDS-PAGE 电泳 8%分离胶5ml 7.5ml 10ml H2O 2300（微升，下面都一样）3450 4600 30%Acrylamide 1300 2025 2700 1.5M Tris-HCl (Ph8.8) 1300 1875 2500 10%SDS 50 75 100 10%过硫酸铵50 75 100 TEMED 3 4.5 6 12%分离胶5ml 7.5ml 10ml H2O 1600 2475 3300 30%Acrylamid...
1. APS配制成10%溶液后,应分装保存在-20°C。将配置成的10%的APS溶液存放在4°C时易发生失效,保存时间较短,应尽量减少室温存放时间,以防失效。 2. TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖并4°C保存。另外凝胶凝聚的速度与温度及光照关系密切,可通过适当调节TEMED 的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度,配置...
一、SDS-PAGE 凝胶制备 1、玻璃板梳子的清洁 先用自来水浸泡5分钟,洗洁精清洗,注意厚玻璃板两侧沟槽容易残留胶,可以用尖锐的东西轻刮,然后用自来水冲洗干净泡沫,再用纯水冲洗即可,37度烘干或者吹风筒吹干,注意别用热风长时间近距离吹,厚玻璃板两侧的边条是用粘胶粘在一起的,高热会使粘胶融化,久而久之可能引起密闭...