• 原因:梳子插入后胶暴露于空气中时间过长。• 解决方案:尽量在 25 分钟内插入梳子,避免长时间暴露。结语 通过详细了解SDS-PAGE凝胶的配制方法及常见问题的解决方案,实验者可以有效提高实验成功率,减少误操作,从而获得高质量的实验结果。一块优质的SDS-PAGE胶能打好蛋白质电泳的基础,从而跑出清晰好看的条...
下面我们将介绍SDS-PAGE电泳试剂的配制方法。 聚丙烯酰胺凝胶电泳胶液配制 1. 将蒸馏水取2L,通过0.22μm的滤膜过滤3遍来除杂质,备用。 2. 将40%(w/v)丙烯酰胺10mL,在干燥器中烘干2小时,然后加入蒸馏水固定容积至50mL。将10%(w/v)N, N’-二甲基亚硫脲5mL加入均聚化溶液中,搅拌30分钟至完全溶解。 3. ...
以下是制作SDS-PAGE凝胶的基本配方和制胶步骤: 配方: 1. 1%丙烯酰胺(Acrylamide)溶液:将3.7g丙烯酰胺和60μl N,N'-亚甲基双丙烯酰胺溶解在0.5ml双蒸水中,搅拌均匀。 2. 2.5%BT(Bis-Tris)溶液:将0.1g BT和0.25ml TBE(三酸乙酸盐电泳缓冲液)混合均匀。 3. 10%过硫酸铵(AMS)溶液:将10μl AMS溶解在1...
答案解析 查看更多优质解析 解答一 举报 配10%的胶10ml,当然用3.33ml 30%的arc-bis储液,1.5M的分离胶缓冲液是4倍的,所以用2.5ml,10%SDS100ul,10%AP100ul,补水至10ml即可. 解析看不懂?免费查看同类题视频解析查看解答 相似问题 5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液配方有谁知道 SDS在SDS-PAGE中的作用是什么? 求...
操作步骤( 1 )在制板支架上置一专用有机玻璃槽,将固定好的玻璃板下部插入槽内,中部用两个文具夹固定在支架竖板上。在槽内倒入已充分溶化的琼脂,冷凝后封闭胶腔底部。( 2 )用直径约 2mm 的聚乙烯管连接好梯度混合器、恒流泵、凝胶模。( 3 ) 30% 胶液的配制取 50ml
SDS-PAGE自制胶操作规程 一:试剂准备 SDS-PAGE电泳所用溶液: 30 %聚丙烯酰胺溶液(100 mL) 丙稀酰胺(Arc)29.2g,N-N-甲叉双丙稀酰胺(Bis)0.8g,加入去离子水定容至100mL,过滤于棕色玻璃瓶中4℃贮存。将商品用的40 %聚丙烯酰胺溶液稀释到浓度为30 %,冰箱4℃保存。 分离胶缓冲液1.5mol/L Tris·HCl,pH8.8:...
SDS-PAGE试剂配方SDS-PAGE电泳所用溶液: 30%聚丙烯酰胺溶液(100mL) 丙烯酰胺(Arc)29g N,N’-亚甲双丙烯酰胺(Bis)1g 用双蒸水定容至100mL,过滤备用,4℃存放 丙稀酰胺29.2g,N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g,加入去离子水定容至100mL,pH值不能超过7.0,过滤于棕色玻璃瓶中4℃贮存。 5×Tris-甘氨酸缓冲液(1L) ...
SDS-PAGE凝胶制备属于实验室最常规的操作了,刚开始做蛋白实验总是在找凝胶配制实验中所用试剂的配方,这里总结了分离胶、浓缩胶、分离胶和浓缩胶缓冲液、考马斯亮蓝染液、样品缓冲液、电泳缓冲液等配方。 1. 分离胶(12%) 配制 所需试剂 所需体积 分离胶(12%) ...
SDS-PAGE_配胶 成分ddH2O30%Bis(丙烯酰胺)0.5mol/LTris(pH6.8)1.5mol/LTris(pH8.8)10%SDS10%ApsTEMED总量分离蛋白线性有效范围 单位mlmlmlmlulululmlkDa 4%浓缩胶1.530.330.6325.0030.003.002.50- 6%分离胶5.202.002.60100.00100.008.0010.00- 7%分离胶4.822.382.60100.00100.008.0010.00...