追求更快速、更灵敏且操作更为简便的RT-qPCR分子诊断试剂已成为当前的主要发展趋势。作为RT-qPCR过程中的关键原料之一,逆转录酶需要具备更快的逆转录速度、更高的合成产量以及更好的耐热性能。为了获得更适用于RT-qPCR的逆转录酶,翌圣生物在M-MLV的基础上通过基因改造,开发出RNase H活性更低,热稳定性更高,持续合成...
为方便大家对逆转录引物的选择,翌圣生物通过基因工程技术开发出Hifair®III系列逆转录试剂盒,包括两种引物形式:单独成管的oligo(dT)、random primer和按比例预混的oligo(dT)、random primer。其中,按比例预混的引物仅适用与qPCR实验中。 PART 05 Hifair®Ⅲ 系列逆转录酶性能展示 1 可耐受60℃反应温度,适合具有...
逆转录(Reverse Transcription)是以RNA为模板,在逆转录酶的催化作用下,合成RNA/DNA杂合双链,然后水解杂合双链中的RNA,得到互补的单链cDNA的过程。得到的cDNA单链可以作为扩增模板,合成双链DNA。cDNA的合成可以用于后续的PCR实验、qPCR实验、基因检测、基因工程...
MIQE指南——RT-qPCR中的逆转录 1、前言 逆转录是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。在逆转录过程中必不可少的逆转录酶,除了其依赖RNA的DNA聚合酶活性,还需要镁离子或锰离子等辅助因子,同时包括依赖于DNA的DNA聚合酶活性和RNase H活性,它可以降解DNA与RNA杂交链中的RNA链。与典型的DNA聚合酶不同...
基因表达谱检测 逆转录PCR一管内完成 一步法RT-qPCR试剂SYBR Green 价格 ￥3192.00 起订量 1盒起批 货源所属商家已经过真实性核验 发货地 北京 北京 产品规格 盒 商品规格 100测试/盒 所属类目 化工能源;化工试剂;生化试剂 产品标签 凡知;RT;qPCR;RNA逆转录;RNA一步法提取;一步法RT;qPCR试剂盒 ...
RT-qPCR master mix:用于双标记探针的冻干RT实时PCR Master Mix;分子生物学。 艾美捷RT-qPCR master mix(PCR-159S)含有SCRIPT逆转录酶、HotStart聚合酶Ab+、dNTP、反应缓冲液、MgCl2和稳定剂。PCR级水 RT-qPCR master mix检测准备: 1. RNA/引物混合液的准备 ...
实时荧光定量多聚核苷酸链式(Real-time Quantitative polymerase chain reaction)RT-qPCR SYBR Green 法 准备:96孔板、封板膜、板架、SYBR Green、DEPC水、实验所需Primer、逆转录得到的cDNA。(10μl体系) 1.实验体系mix1(5.8μl),每种引物的mix1要看有多少个样本,样本数=分组×每组的样本数×点样重复次数。每...
(三)RNA 逆转录为 cDNA 1.去除基因组 DNA 反应 (1)在 RNase-free 离心管中按照下表配制 10mμL 体系(以 Takara 试剂盒 Prime Script™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time),SYBR Green Ⅰ法为例)。 试剂 使用量 5×gDNA Eraser Buffer Buffer 2.0 μl gDNA Eraser Total RNA 2μ...
逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)将逆转录反应(RT)与实时荧光聚合酶链式反应(qPCR)相结合,是当下病原学分子诊断的常用方法。RT-qPCR以RNA为起始材料,在RT阶段,运用逆转录酶以RNA为模板形成互补的DNA链(cDNA)。随后以cDNA为模板进行qPCR反应。RT-qPCR已被用于多种分子生物学的应用中,其中包括病原体检测、基...
Real-time RT-PCR是qPCR和RT-PCR的组合,其中的“RT”是Reverse transcription(逆转录)的意思,所以RT-qPCR就是结合了荧光定量技术的逆转录PCR,即以mRNA或总RNA为模板,先反转录得到cDNA,再以cDNA为模板,通过荧光定量PCR进行定量检测分析。因为RT-PCR只可以定性,但不能进行定量分析。与RT-PCR一样,RT-qPCR定量分析...