一、 RT-PCR 常用的内参引物 内参基因名称 引物 引物 最佳退火 扩增基因库序列号 引物名称 序列 位置 Tm 温度 C 长度Human actin beta F305 ctgggacgacatggagaaaa 305-324 52.3 BC002409 R868 aaggaaggctggaagagtgc 868-849 52.6 59.4 564 F1379 agcgagcatcccccaaagtt 1379-139857.3 Rat actin beta R1663 ...
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RT-PCR常用的内参引物 下载积分:1500 内容提示: 一、 常用的 b-actin 引物序列 human actin f ctc cat cct ggc ctc gct gt human actin r gct gtc acc ttc acc gtt cc product size:268 rabbit actin r agt gcg acg tgg aca tcc g rabbit actin f tgg ctc taa cag tcc gcc tag product size:...
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引物加的量应该相同,能放在一管里跑最好,但是分开跑也可以接收(一般都是这样)
要回答这个问题必须看你引物的序列。你贴出来我帮你查一下,你自己也可以BLAST一下。如果在人和鼠的基因中都可以BLAST到,则可以用,否则就不可以。虽然这些House Keeper基因的同源性很高,如果引物不在同源区,还是没办法混用的。
要回答这个问题必须看你引物的序列。你贴出来我帮你查一下,你自己也可以BLAST一下。如果在人和鼠的基因中都可以BLAST到,则可以用,否则就不可以。虽然这些House Keeper基因的同源性很高,如果引物不在同源区,还是没办法混用的。
上下引物的 Tm最好相似,不能差异太大,不然不好设计退火温度;内参条带很亮,说明RT应该没多大问题,问题可能出现在PCR上。没有目的基因是因为 1 该基因确实不表达;2 你的引物不特意,到NCBI的PrimerBlast 看看;