内参基因是在不同条件下表达稳定的基因,其表达水平相对不会受到实验条件和样本差异的影响,因此可以作为一个相对稳定的标准来校正目标基因的表达水平。 内参基因的选择是RT-PCR实验中一个非常关键的步骤。一般来说,内参基因应满足以下几个条件: 1.广泛表达:内参基因应在所研究的样本中广泛表达,以确保其在不同条件下...
存在多种异构体,如β-actin在肌肉组织中分布较少,心肌中主要是alpha-cardiac muscle actin蛋白。 因此,并不是所有组织都适合选β-actin作为内参。 如果研究模型是心或骨骼,β-actin作为内参显然不合适。 当细胞向恶性转化时,β-actin mRNA的表达水平增加,正常组和肿瘤组间的β-actin的表达差异相当大,限制了β-act...
你说的应该是real time PCR吧,注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写,和real time一定要分开来.常说的qPCR,qRT-PCR,都是通过实时(real time)的方法,测定样品中某个模版的起始量ct值但是呢,由于之前RNA提取、反转等步骤,各个步骤存在不同的效率,ct值并无法真实反应样品中模版的绝对量,因此,需要一个内参...
内参基因在反转录PCR（RT-PCR）实验中扮演着关键角色。内参基因通常存在于每一份样本中，其表达水平相对稳定，能够在一定程度上反映实验条件的一致性。在进行RT-PCR实验时，研究人员通常会使用内参基因来校正样本之间的差异，确保实验结果的可靠性和可比性。具体来说，在RT-PCR实验中，内参基因的引入可以通...
一般而言，对于实时荧光定量PCR，内参基因的片段长度应控制在300bp以下，以确保其在扩增过程中表现稳定。内参基因的选择应基于其在样本中的表达水平相对恒定，不受实验条件或处理方式的影响。常见的内参基因包括18S rRNA和actin，它们在不同组织和细胞类型中表达较为稳定。18S rRNA作为植物和真核生物的内参...
反转录RT—PCR的内参如何选择? RT—PCR就是将RNA先反转录为cDNA,再将转录得到的cDNA作为模板进行PCR反应扩增目标片段。用于反转录的引物根据实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT及基因特异引物的一种。对于短的不具有发卡结构的真核细胞mRNA三种都可。 1)随机引物:适用于长的具有发卡结构的RNA。适用于rRNA、mRNA...
RT-PCR常用的内参引物 下载积分: 1500 内容提示: 一、 常用的 b-actin 引物序列 human actin f ctc cat cct ggc ctc gct gt human actin r gct gtc acc ttc acc gtt cc product size:268 rabbit actin r agt gcg acg tgg aca tcc g rabbit actin f tgg ctc taa cag tcc gcc tag product size:...
一、RT-PCR常用的内参引物 内参基因名称引物引物 最佳退 火扩增 基因库序列号 引物名称序列 位置Tm温度C长度 HumanactinbetaF305ctgggacgacatggagaaaa305-32452.3 BC002409R868aaggaaggctggaagagtgc868-84952.659.4564 F1379agcgagcatcccccaaagtt1379-139857.3 ...
在细菌定量PCR实验中，常用的内参包括：16S rRNA基因：这是一种高度保守的基因，在细菌中广泛存在。在...
1.《Selection of reference genes for RT-PCR studies in blood of beluga whales (Delphinapterus leucas)》 作者从四只白鲸身上采集了六十份血液样本。使用RT-PCR测试了13个候选内参基因(β-actin,B2M,GAPDH,HPRT1,LDHB,PGK1,RPL4,RPL8,RPL18,RPS9,RPS18,TFRC,YWHAZ)。对结果的全面分析显示,β-actin、RPL...