实时荧光定量RT.PCR内参基因的选择木 陈凤花,王琳综述,胡丽华审校(华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科,武汉430022) 关键词:实时荧光定量RT.PCR;内参基因 实时荧光定量RT—PCR(real—timefluorescentquantitative revcme transcription—polymerase chain reaction,rQRT-PCR)是 ...
实时荧光定量RT-PCR内参基因的选择,实时荧光定量RT-PCR内参基因的选择,实时荧光定量RT-PCR,实时荧光定量RT-PCR内参,内参基因的选择,实时荧光定量PCR内参基因的选择,实时荧光定量PCR内参基因的
实时荧光定量RT-PCR内参基因的选择 实时荧光定量RT-PCR(real-time fluorescent quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,FQ RT-PCR)是检测低丰度mRNA的敏感方法,为了去除不同标本在RNA的产量、质量以及逆转录效率上可能存在的差别而获得目标基因特异性表达的真正差异,通常选择一定的内参基因进行校正和...
荧光定量RT-PCR内参基因水稻缺素geNorm营养元素的吸收和利用是影响水稻产量的重要决定因素。利用qRT-PCR进行缺素胁迫下水稻功能基因的表达分析时,应当筛选适合于缺素胁迫下qRT-PCR分析的内参基因。本研究以缺乏氮、磷、钾、钙、镁、硫6种大量元素1周和2周的水稻(Oryza sativa L. ssp. japonica)幼苗组成的缺素样品...
利用qRT-PCR进行缺素胁迫下水稻 功能基因的表达分析时,应当筛选适合于缺素胁迫下qRT-PCR分析的内参基因。本研究以缺乏氮、磷、 钾、钙、镁、硫6种大量元素1周和2周的水稻(OryzasativaL.ssp.japonica)幼苗组成的缺素样品池为材料, 选取l2个水稻管家基因作为缺素条件下qRT-PCR的候选内参基因,利用geNorm软件分析缺...
real-time PCR, RT-qPCR)。通过在 qPCR 反应中使用 cDNA 来测量 RNA 水平，从而可以快速检测基因表达...
一般认为普通的RT-PCR是半定量的，即可以反映一定的剂量水平，但无法完全定量。无法完全定量的原因很多，...
1.通过对目的样品进行梯度稀释进行PCR扩增效率的检测 2.通过内部扩增对照来反应样品处理过程中样本的情况 3.用细菌基因组检测临床样品的抑制 4.通过标准人工合成的扩增进行RT-PCR来反应目标检测物的抑制情况 反转录反应系统 1.RT和PCR单一酶系统 2.RT和PCR分离的酶系统 3.RNA逆转录引物的选择 引物主要有三种: 1...
任意qRT-PCR实验的可靠性均可以通过在实验中引入一个不变的内参对照得到改善,这样做有助于改善qRT-PCR的样品间差异以及样品定量过程中的误差。一个好的对照,其表达水平应当在所分析的样品中保持不变。通常我们使用18S rRNA作为对照,因为它相比其他传统内参对照如ß-actin或...