RT-PCR中引物的选择指南
一般用于mRNA转录水平的定量研究、不同样本或基因组中DNA拷贝数的测定、基因芯片结果验证、药效分析等。 载基采用SYBR荧光染料法进行荧光定量PCR检测,从引物设计到检测一次性完成,提供2种常用的内参引物及免费的专业数据分析,每个样品设置至少三个平行对照,保证结果的准确可靠。 实验流程: 实验步骤: RNA提取 1) 细胞样...
准备阶段:合成引物,购买RNA提取试剂盒,购买反转录试剂盒,购买RT-PCR试剂盒,购买耗材:八联管,无酶加样枪头,无酶手套。 在进行RT-PCR之前,我们需要设计拟分析基因的引物,如何设计呢?首先我们需要找到该基因的编码序列CDS(Coding sequence)。这里我们以血红素加氧酶HO-1基因为例,在PubMed中的Gene数据库中进行查找。
内容提示: 一、 RT-PCR 常用的内参引物 内参基因名称 引物 引物 最佳退火 扩增基因库序列号 引物名称 序列 位置 Tm 温度 C 长度Human actin beta F305 ctgggacgacatggagaaaa 305-324 52.3 BC002409 R868 aaggaaggctggaagagtgc 868-849 52.6 59.4 564 F1379 agcgagcatcccccaaagtt 1379-139857.3 Rat actin ...
RT-PCR引物设计 检测p53基因在血细胞中的表达情况 实验思路 实验标题：检测p53基因在血细胞中的表达情况 01、输入您的文字标题 实验步骤 10% 20% 提取血细胞 提取RNA 30% RT-PCR 40% 检测DNA 01 提取血细胞、RNA 提取血细胞、RNA •提取血细胞•破碎血细胞•分离RNA•沉淀RNA•洗涤RNA•溶解RNA•...
RT-PCR常用的内参引物 下载积分:1500 内容提示: 一、 常用的 b-actin 引物序列 human actin f ctc cat cct ggc ctc gct gt human actin r gct gtc acc ttc acc gtt cc product size:268 rabbit actin r agt gcg acg tgg aca tcc g rabbit actin f tgg ctc taa cag tcc gcc tag product size:...
实时荧光定量PCR的十大最常见陷阱 引物和探针设计不当 为了最高效地设计用于实时荧光定量PCR的引物和探针,我们强烈建议您使用引物设计软件。大多数引物设计程序均包含了可调节的参数以设计最佳的引物和探针。这些参数涉及了引物/探针的Tm值、互补性、二级结构以及扩增子大小等重...
0 评论次数: 0 文档热度: 文档分类: 待分类 文档标签: 最多10项之间用或分割 系统标签: 内参pcr第一百生物医药部落 一、RT-PCR常用的内参引物内参基因名称引物引物最佳退火扩增基因库序列号引物名称序列位置Tm温度C长度HumanactinbetaF305ctgggacgacatggagaaaa305-32452.3BC002409R868aaggaaggctggaagagtgc868-84952.65...
qPCR-定量PCR-Graphpad 作图教程-数据作图 计算步骤: 一般一种处理即需要一个内参,同一个处理的多个基因可以共用一个内参。 内参Ct计算均值(可选); 目的基因 - 内参均值 = dCt;(可以按replicate相减,不用均值) 处理- 对照 = ddCt; Log2FC = -ddCt; ...
内参pcr吴河路北桥闵行区邮编 一、RT-PCR常用的内参引物 内参基因名称引物引物 最佳退 火扩增 基因库序列号 引物名称序列 位置Tm温度C长度 HumanactinbetaF305ctgggacgacatggagaaaa305-32452.3 BC002409R868aaggaaggctggaagagtgc868-84952.659.4564 F1379agcgagcatcccccaaagtt1379-139857.3 R1663gggcacgaaggctcatcat...