RT-PCR常用的内参引物 下载积分: 1500 内容提示: 一、 常用的 b-actin 引物序列 human actin f ctc cat cct ggc ctc gct gt human actin r gct gtc acc ttc acc gtt cc product size:268 rabbit actin r agt gcg acg tgg aca tcc g rabbit actin f tgg ctc taa cag tcc gcc tag product size:...
有研究认为β-actin在肝组织的内脏组织中的表达不稳定,不是内参的最佳选择。 18S rRNA 🌐 存在于核糖体小亚基中,其编码基因rDNA在生物演化过程中相当保守。 存在于所有真核生物细胞中,易于使用通用引物扩增。 rRNA的合成是由RNA聚合酶I合成,mRNA是由RNA聚合酶II合成,因此rRNA合成的调节独立于mRNA,在影响mRNA表达...
一、RT-PCR常用的内参引物TmCHumanactinbetaF305ctgggacgacatggagaaaa305-32452.3BC002409R868aaggaaggctggaagagtgc868-84952.659.4564F1379agcgagca..
内容提示: 一、RT-PCR 常用的内参引物 内参基因名称 内参基因名称 引物 引物 引物 引物 Tm 最佳退最佳退火 火 温度 C 长度扩增扩增基因库序列号 基因库序列号 引物名称 引物名称 序列 序列 位置 位置 温度长度Human actin beta BC002409 Rat actin beta NM_031144 Mouse actin beta NM_007393 human GAPDH BC...
一、RT-PCR常用的内参引物 内参基因名称引物引物 最佳退 火扩增 基因库序列号 引物名称序列 位置Tm温度C长度 HumanactinbetaF305ctgggacgacatggagaaaa305-32452.3 BC002409R868aaggaaggctggaagagtgc868-84952.659.4564 F1379agcgagcatcccccaaagtt1379-139857.3 ...
定量pcr仪是:伯乐的CFX96 定量软件:Bio-rad CFX manager 3.1 标准的CQ值范围:18-28之间 CQ值代表的是循环数,CQ值越大,表达量越低。 排板的方法: 1.横向基因纵向样本 sample1_repeat1|sample1_repeat2|sample1_repeat3|内参重复1|内参重复2|内参重复3| ...
RT-PCR中引物的选择指南
RT-PCR操作步骤RT-PCR操作步骤(20 ul反应体系) 一、试剂准备 1 RNA提取试剂:Trizol 1.1氯仿 1.2异丙醇 1.3无水乙醇 1.4 0.1%DEPC水 2第一链cDNA合成试剂盒 3 PCR:荧光定量试剂盒 3.1目的基因引物 3.2内参基因引物 二、仪器、耗材 离心管、离心机、水浴锅、PCR管、电泳仪、凝胶图像分析系统、移液枪、离心管...
1各类 PCR ，分不清？PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应，是指在 DNA 聚合酶催化下，以母链 DNA 为模板，以特定引物为延伸起点，反应体系中加入 dNTP、Mg2+ 等原料，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板 DNA 互补的子链 DNA 的过程，可快速特异性地在体外扩增目的 DNA[1][2]。...
分离 RNA,通过逆转录 (RT) 生成 cDNA; 然后进行 PCR 以扩增感兴趣的区域。(B) RT-qPCR 程序。在开始 qPCR 程序之前,分离 RNA 并生成 cDNA。 注:RNA 质量至关重要!!!OD260/280=1.9-2.1 的 RNA 才 "优秀" 此外,选择合适的内参 (或内标) 是非常重要的,这关系到实验结果的准确性和可靠性。小 M 为...