品牌 CFX Connect RT-qPCR 价格说明 价格:商品在爱采购的展示标价,具体的成交价格可能因商品参加活动等情况发生变化,也可能随着购买数量不同或所选规格不同而发生变化,如用户与商家线下达成协议,以线下协议的结算价格为准,如用户在爱采购上完成线上购买,则最终以订单结算页价格为准。 抢购价:商品参与营销活动的...
反应结束后确认RT-qPCR 的扩增曲线和融解曲线，进行 PCR 定量时制作标准曲线等。分析方法参见仪器操作手册。5.数据分析 一般有相对定量和绝对定量两种分析方法，相对定量是检测实验组和对照组中靶基因的倍数差异，特别适合在对RNA模板的数量不能精确定量，或者只需要知道目的基因的表达差异时，另外，相对定量需要进行归一...
·不同公司的qPCR仪器适配的耗材和试剂可能不同,提前阅读仪器说明书或咨询仪器工程师、实验室人员等确认,仪器和耗材或试剂不兼容可能会导致结果偏差。 ·qPCR板上不能做标记,极有可能影响荧光信号的采集,若担心加样有误可使用实验记录本协助记忆。 ·多数仪器光源要求使用2000h后进行更换。 至此,RT-qPCR实验详解内容...
1 qPCR仪器工作原理 qPCR仪器是由荧光定量系统和计算机组成，主要包括这三个反应模块：激发光发射源，接收装置，PCR反应模板。在PCR反应模块中进行qPCR反应，当仪器的激发光发射源发出一定波长的光线，遇到qPCR反应体系中的荧光基团则会反射另外一个波长的光线，此时被接收装置实时接收，接收的数据传送至计算机，计算机...
二、仪器上qPCR反应步骤的设置(图 2.1) 图2.1 qPCR反应体系设置 1、预变性 预变性是将样本和反应缓冲液混合在一起,在高温下(通常为95℃)孵育一段时间,以使DNA或RNA解离。这样做可以防止样本中的DNA或RNA在PCR反应中不完全解离,从而影响PCR反应的准确性。
什么是实时荧光定量PCR (RT-PCR,qPCR)? 实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)指的是在PCR进行的同时,对其过程进行监测的能力(即实时)。因此,数据可在PCR扩增过程中,而非PCR结束之后,进行收集。这为基于PCR的DNA和RNA定量方法带来了革命性的变革。在实时荧光定量PCR (qPCR)中,反应以循环中首次检测到目...
经过演化和革新，PCR技术已经发展了三代：普通PCR技术、实时荧光定量PCR技术（qPCR）以及数字PCR（dPCR）技术。图1 PCR仪器的发展历程（Lee NY., 2018）二、PCR的原理 PCR的基本原理与DNA的体内复制相类似，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火和延伸三个基本反应步骤构成：① 模板DNA的...
PCR技术自问世以来,在生物科学领域、分子诊断领域、亲子鉴定、法医鉴定以及犯罪调查等方面发挥了巨大作用,是迄今为止最为重要的技术之一。经过演化和革新,PCR技术已经发展了三代:普通PCR技术、实时荧光定量PCR技术(qPCR)以及数字PCR(dPCR)技术。 图1 ...
RT-qPCR是通过检测反应体系中的荧光强度来检测PCR扩增产物的,其荧光标记方法分为两种:荧光染料嵌合法和荧光探针法。 1.荧光染料嵌合法 荧光染料嵌合法即应用一种带有荧光的、非特异的DNA结合染料检测PCR过程中积累的扩增产物。常用SYBR Green I染料,该染料在游离状态下几乎不会产生荧光,可以非特异地结合在双链DNA的...
·不同公司的qPCR仪器适配的耗材和试剂可能不同,提前阅读仪器说明书或咨询仪器工程师、实验室人员等确认,仪器和耗材或试剂不兼容可能会导致结果偏差。 ·qPCR板上不能做标记,极有可能影响荧光信号的采集,若担心加样有误可使用实验记录本协助记忆。 ·多数仪器光源要求使用2000h后进行更换。 至此,RT-qPCR实验详解内容...