1. 打开Q2000B荧光定量PCR 仪,确认仪器设置正确。 2. 在全真彩触控屏上编辑 RT-QPCR 实验程序,包括预变性、扩增循环、延伸等步骤。 3. 配置 PCR 反应体系,加入 cDNA 产物、Master Mix、引物等。 4. 将反应体系分装至多孔板中,设置阴性对照、空白对照、标准品和未知样品等。 5. 将多孔板放入 Q2000B 荧光定...
实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)指的是在PCR进行的同时,对其过程进行监测的能力(即实时)。因此,数据可在PCR扩增过程中,而非PCR结束之后,进行收集。这为基于PCR的DNA和RNA定量方法带来了革命性的变革。在实时荧光定量PCR (qPCR)中,反应以循环中首次检测到目标扩增的时间点为特征,而非在一定循环数后目标...
LTP-Q1000系列实时qPCR系统 规格 产品名称 兽医实时聚合酶链反应机 仪器性能 样本块容量 48口井 * 0。1毫升 反应体积 10-50ul (推荐20ul) 管选项 薄型、白色或透明的pcr管或带光学平盖的管带 加热和冷却技术 新一代Peltier技术允许1,000,000循环 控制方法 通过个人电脑或仪器上的独立触摸屏操作 光学系统 创新...
实时荧光定量 PCR,简称 RT-QPCR, 属于 Q-PCR 的一种,目前该技术已得 到广泛应用,如:扩增特异性分析、基因定量分析、基因分型、SNP 分析等。荧 光定量 PCR 最常用的方法是 DNA 结合染料 SYBR GreenⅠ的非特异性方法和 Taqman 水解探针的特异性方法。 SYBR Green I 是一种结合于所有 dsDNA 双螺旋小沟区域的...
一步法RT-qPCR是常用的RNA分析方法之一。在一步RT-qPCR中,反转录酶和DNA聚合酶预混于同一管内,从而使得在单个反应中就可同时进行反转录和DNA扩增。相比于进行完反转录,准备试剂配制荧光定量反应的两步法而言,一步RT-qPCR更加简单快速,移液步骤更少,污染的风险大大降低,对于高通量实验应用十分适宜。Hifair®...
Real-time qPCR中常用的荧光探针为TaqMan探针,根据目的基因设计合成特异性的探针,该探针的5'端标记荧光基团,3'端标记淬灭基团。 正常情况下两个基团的空间距离很近,荧光基因因淬灭而不能发出荧光。PCR扩增时,引物与该探针同时结合到模板上,探针的结合位置位于上下游引物之间。当扩增延伸到探针结合的位置时,Taq酶利用...
c) 不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同,请根据最短时间限制进行设置。 相关产品 产品名称 货号 规格 价格(元) 促销价(元) Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus) 11121ES60 100 T 935 / Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR(gDNA digester ...
实时荧光定量 PCR (RT-qPCR) 是一种用于实时扩增和检测特定 DNA 或RNA 序列的分子生物学技术。该方法利用荧光染料或探针,当与扩增的 DNA 或RNA 分子结合时会发出信号,从而可以对目标序列进行量化。RT-qPCR 通常用于基因表达分析、病毒载量定量和基因突变检测等应用。 RT-qPCR原理的三个主要步骤: 1、反转录: 1...
1 qPCR仪器工作原理 qPCR仪器是由荧光定量系统和计算机组成,主要包括这三个反应模块:激发光发射源,接收装置,PCR反应模板。在PCR反应模块中进行qPCR反应,当仪器的激发光发射源发出一定波长的光线,遇到qPCR反应体系中的荧光基团则会反射另外一个波长的光线,此时被接收装置实时接收,接收的数据传送至计算机,计算机...
一. RT-qPCR 基本原理和概念实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。 以cDNA 为模板进行 PCR,在 PCR 扩增过程中,通过收集荧光信号,对 PCR进程进行实时...