图4 我司RNA Pull-down案例展示：（A）体外转录法电泳检测图（阳性），左图：PCR扩增DNA的电泳；右图：体外转录标记RNA的电泳；（B）RNA Pull-down的银染结果；（C）MS差异蛋白鉴定及KEGG分析。伯远医学拥有一流的技术团队、丰富的项目经验，提供专业RNA Pull-down技术服务，适用于RNA与蛋白结合的领域研究，欢迎大...
RNA pull-down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验手段之一。RNA pull down是使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物...
RNA pull down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验方法之一。使⽤体外转录法标记⽣物素RNA探针，然后与胞浆蛋⽩提取液孵育，形成RNA-蛋⽩质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合，从⽽与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后，通过WB 实验检测特定的RNA 结合蛋⽩是否与RNA 相互作...
在摇床上室温摇动10 min，摇动速度为60-70 rpm。水洗涤：弃银染终止液，加入100 ml Milli-Q级纯水或双蒸水，在摇床上室温摇动2-5 min，摇动速度为60-70 rpm。保存：可在Milli-Q级纯水或双蒸水中保存。或采用适当的方式制备成干胶。十、实验结果 10.1 WB预实验验证抗体质量（WB项目-质控1）例如：结果说明...
1实验目的:构建hsa_circ_0007142全序列载体, 并以hsa_circ_0007142质粒全长序列为模板PCR扩增获取含有T7 promoter序列的正义链和反义链DNA,作为体外转录制备RNA pull down探针的模板。 2实验材料 l主要试剂 l主要仪器及器材 3基因及载体信息 基因名称:hsa_circ_0007142 ...
RNApull-down实验 RNApull-down实验 RNA pull-down实验 定义：使⽤体外转录法标记⽣物素RNA探针，然后与胞浆蛋⽩提取液孵育，形成RNA-蛋⽩质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合，从⽽与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后，通过western blot实验检测特定的RNA结合蛋⽩是否与RNA相互作⽤。
RNA pull-down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验手段之一。RNA pull-down使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通...
RNA Pull Down 实验流程。 注释:① 目标 RNA 生物素标记;② 磁珠富集 RNA;③脱;⑤ RNA 结合蛋白孵育;④ RNA 结合蛋白洗 WB 或者 MS 检测 常见问题: 问题 1:RNA 降解 可能原因:1)无核酸酶的环境被破坏; 2)体外转录的 RNA 探针降解 解决办法:1)清洗和使用新开的离心管和试剂等 2)RNA 探针合成后,电泳...
RNA pull down 实验步骤1、构建 RNA 过表达质粒：基因合成 +测序验证；2、体外转录模板准备：设计含 T7 启动子引物，PCR 扩增得到转录模板；3、体外转录：以 PCR 产物为模板，体外转录得到目的 RNA；4、RNA pull down ：通过磁珠 -RNA 探针复合物富集互作的蛋白；5、银染质检：SDS -PAGE 电泳银染检测富集蛋白...
RNA拉down实验的流程包括以下几个步骤: (1)细胞膜去除:首先,细胞膜应该去除,以便将蛋白质依赖性及质粒依赖性的RNA分离出来。 (2)细胞抽取:其次,细胞抽取,这一部分采用磁珠沉淀技术,通过使用带有抗体的纳米级磁珠,将细胞中特定的RNA聚集起来,其中的RNA聚集物可以进行更详细的分析。 (3)RNA水解:之后,RNA水解,利用...