在黑暗室温下,使用3 ml的Western Blotting Substrate孵育尼龙薄膜。封膜处理后,用超薄膜ECL进行曝光,以获得适当的曝光时间,最后显影观察。 图5. Dot blotting操作步骤示意图 RNA甲基化整体水平的鉴定今天就讲完啦,大家记得收藏学习哦~ 云序相关产品推荐: m6ARNA甲基化测序 m5CRNA甲基化测序 m1ARNA甲基化测序 RIP测序...
目前RNA甲基化整体水平的鉴定所用的技术手段包括液相色谱联用(LC-MS)、比色法以及Dot blotting等。下面就分别来介绍目前较为流行的RNA甲基化整体水平的鉴定方法。 图1. RNA甲基化的主要类型 1. LC-MS/MS LC-MS/MS在液相质谱的基础上采用串联质谱,能够获得分子离子峰和碎片离子峰,可对碱基同时进行定性和定量分析...
与其他方法相比,如二维薄层色谱和LC-MS/MS等,使用Dot blotting检测mRNA中m6A甲基化总体水平的方法相对简单、快速且成本较低。第一步是总RNA的提取,使用Dynabeads® mRNA Purification Kit分离出mRNA,采用NanoDrop方法检测mRNA的纯度,并稀释成不同的浓度。第二步Dot blotting,在95℃的高温下将连续稀释的mRNA变性。在...
Researchers have also studied the distribution and regulation of m5C on lncRNA and found that m5C ispositively correlated with lnc RNA transcription. It is also involved inlong-distance chromatin interactions at lncRNA sites. Additionally, lncRNAs regulated by different m5C regulators are associated wit...
【摘要】目前RNA甲基化整体水平的鉴定所用的技术手段包括液相色谱联用(LC-MS)、比色法以及Dot blotting等。 RNA甲基化(RNA methylation)是一类表观遗传修饰,在已经发现的超过100种不同的RNA化学修饰中,主要有6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine, m6A)、5-甲基胞嘧啶(C5-methylcytidine, m5C)和1-甲基腺嘌呤(N1-meth...
与其他方法相比,如二维薄层色谱和LC-MS/MS等,使用Dot blotting检测mRNA中m6A甲基化总体水平的方法相对简单、快速且成本较低。第一步是总RNA的提取,使用Dynabeads® mRNA Purification Kit分离出mRNA,采用NanoDrop方法检测mRNA的纯度,并稀释成不同的浓度。第二步Dot blotting,在95℃的高温下将连续稀释的mRNA变性。在...
(A)Western blotting分析心脏组织中Mettl1蛋白水平。 (B)Dot blot分析心脏组织中m7G修饰水平。 (C)qRT-PCR分析Mettl1 mRNA水平。 (D)Western blot分析心脏组织中Mettl1蛋白水平。 (E)α-actinin和Mettl1染色的代表性免疫荧光图像。 (F)心脏组织Mettl1 mRNA水平的qRT-PCR分析。
主要有6-甲基腺嘌呤（N6-methyladenosine, m6A）、5-甲基胞嘧啶（C5-methylcytidine, m5C）和1-甲基腺...
(A)Western blotting分析心脏组织中Mettl1蛋白水平。 (B)Dot blot分析心脏组织中m7G修饰水平。 (C)qRT-PCR分析Mettl1 mRNA水平。 (D)Western blot分析心脏组织中Mettl1蛋白水平。 (E)α-actinin和Mettl1染色的代表性免疫荧光图像。 (F)心脏组织Mettl1 mRNA水平的qRT-PCR分析。
5hmC dot blotting To perform dot blot, RNA was treated with TURBO DNase (ThermoFisher) following the manufacturer's protocol. As a control, RNA was treated with 1U RNase A (Qiagen) for 1 h at 56 °C. RNA was then loaded onto a Hybond-N + mem- brane (GE Healthcare), ...