这可能指示 m7 G 修饰在耐药机制中的潜在角色。 2.Journal of Experimental & Clinical Cancer Research|RNA dot blot 检测发现与 LNCaP 细胞相比,LNCaP-AI 和 C4-2 细胞中 mRNA 内的 m7 G 修饰水平更丰富 图源:Journal of Experimental & Clinical Cance...
16,用ddH2O清洗至背景大致干净即可,约30-60s 17,白光成像采集亚甲蓝染色后的图像作为负载对照。
1.将已知浓度的样本样品，用无酶离心管进行梯度稀释（并上操作）2.短暂离心，然后将RNA样品95℃加热3分钟，结束后迅速转到冰上冷却，防止重新形成二级结构。3.用1ml枪头粗端在NC膜上留下圆形印痕并用铅笔描圈，以引导加样，并将 NC膜裁剪成合适的尺寸，转移至干净的培养皿中。4.取2μl RNA样品按顺序滴在NC...
用NanoDrop方法检测mRNA的纯度,并稀释成不同的浓度。 (2)RNADot blotting Step1:取出待测RNA样本,解冻后测量RNA浓度,全程冰上操作。 Step2:将样品浓度统一,并在新的无酶管连续稀释样品并混匀,稀释梯度不固定,可自己试试最好效果。我选择的终浓度为400/200/100μg/μL。 Step3:离心后,将RNA样品95℃加热3分钟...
根据Abcam官网提供的RNA dot bloting protocol,进行实验在实验过程中适当更改实验条件,形成实验笔记。 RNA dot blot 一、试剂 RNA样本 无RNase水 TBST(1x TBS,0.1% Tween-20) 封闭液一抗 二抗(山羊抗兔 IgG-HRP, ab97051, 或山羊抗小鼠 IgG-HRP)
1、将已知浓度的样本样品,用无酶离心管进行梯度稀释(并上操作) 2、短暂离心,然后将RNA样品95℃加热3分钟,结束后迅速转到冰上冷却,防止 重新形成二级结构。 3、用1ml枪头粗端在NC膜上留下圆形印痕并用铅笔描…
RNA Dot blot 实验流程 1、将已知浓度的样本样品,用无酶离心管进行梯度稀释(并上操作) 2、短暂离心,然后将RNA样品95℃加热3分钟,结束后迅速转到冰上冷却,防止 重新形成二级结构。 3、用1ml枪头粗端在NC膜上留下圆形印痕并用铅笔描圈,以引导加样,并将 NC膜裁剪成合适的尺寸,转移至干净的培养皿中。
1. RNA待测样本（建议先进行mRNA纯化）2. 无酶水 3. TBST（1×TBS， 0.1%Tween-20）4. 封闭液 5. 一抗 6. 二抗 7. ECL显影液 8. 亚甲蓝染色缓冲液（0.4M醋酸钠、0.4M醋酸中的0.2%亚甲蓝）二、实验设备 无酶EP管 加热设备 NC膜 或 带正电荷的尼龙膜（建议使用尼龙膜）干净的塑料...
抗原抗体与受体配体结合被利用做蛋白质。此原理是受体抗原抗体和受体配体结合被利用做蛋白质的简单定量分析。被吸附在96孔板底部的抗原抗体或者受体配体可以被标记的抗体识别，并进行定量计数形成定量分析的基础。由于培养细胞需要不断监测，所以工作量很大。快速简洁的定量分析是监测细胞表达水平监测的重要手段。
1)整体水平检测:TLC、Dot-blot和LC-MS/MS; 2)转录组范围内m6A修饰高通量检测(图1): 基于特异性抗体的测序技术(MeRIP-seq/m6A-seq、m6A-seq2、m6A-CLIP/miCLIP);非抗体依赖的测序技术(m6A-SEAL-seq、m6A-SAC-Seq、Nanopore Direct RNA Seq、GLORI-Seq); ...