RNA免疫共沉淀—RIP-seq(RNA Immunoprecipititation)是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术,RIP利用目标蛋白的抗体将相应的RNA-蛋白复合物(RBP)沉淀下来,分离纯化捕获的RNA,结合高通量测序技术对目标RNA进行测序分析。RIP可以看成是普遍使用的染色质免疫沉淀ChIP技术的类似应用,蛋白结合对象为RNA,RIP-seq即对富集得到的...
🔍 实验原理 RIP技术(RNA Binding Protein Immunoprecipitation,RNA结合蛋白免疫沉淀)是一种研究细胞内RNA与蛋白结合情况的重要方法。其基本原理包括:利用特异性抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中的内源性RNA结合蛋白→通过清洗磁珠来减少非特异性RNA的结合→将RNA结合蛋白及其结合的RNA共沉淀,并进行RNA纯化→最后...
RIP可以看成是普遍使用的染色质免疫沉淀ChIP技术的类似应用,但由于研究对象是RNA-蛋白复合物而不是DNA-蛋白复合物,RIP实验的优化条件与ChIP实验不太相同(如复合物不需要固定,RIP反应体系中的试剂和抗体绝对不能含有RNA酶,抗体需经RIP实验验证等等)。RIP技术下游结合microarray技术被称为RIP-Chip,帮助我们更高通量地了...
其中，RIP技术（RNA结合蛋白免疫沉淀）尤为关键，它通过针对目标蛋白的抗体将相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来，经过纯化分离后，可以对复合物上的RNA进行qPCR验证或测序分析。RIP技术作为一种研究细胞内RNA与蛋白结合情况的方法，已成为揭示转录后调控网络动态过程的重要手段。在分子相互作用的技术领域中，除了RIP技术，还有...
3、RIP Wash Buffer 、0.5M EDTA 、RNase Inhibitor 置于冰上 B.RNA结合蛋白免疫沉淀实验过程 1、准备 RIP Immunoprecipitation Buffer; 2、将前上步的 enpendoff 管放磁力架上,去上清,每管加入 900 μl RIP Immunoprecipitation Buffer; 3、迅速解冻第一步制备的细胞裂解液, 14,000 rpm ,4℃离心 10 min。吸...
分析与目的蛋白结合的RNA.运用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,然后经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA进行分析;即用抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性的RNA结合蛋白,防止非特异性的RNA的结合,免疫沉淀把RNA结合蛋白及其结合的RNA一起分离出来,结合的RNA序列可通过microarray(RIP-...
这可以利用RIP技术，即RNA结合蛋白免疫沉淀法，通过针对目标蛋白的抗体将相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来，经过纯化分离后，可以对复合物上的RNA进行qPCR验证或测序分析。RIP技术，即RNA结合蛋白免疫沉淀法，是研究细胞内RNA与蛋白质结合情况的重要手段，为揭示转录后调控网络的动态变化提供了有力支持。此外，还存在着其他...
RNA免疫共沉淀—RIP-seq(RNA Immunoprecipititation)是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术,RIP利用目标蛋白的抗体将相应的RNA-蛋白复合物(RBP)沉淀下来,分离纯化捕获的RNA,结合高通量测序技术对目标RNA进行测序分析。RIP可以看成是普遍使用的染色质免疫沉淀ChIP技术的类似应用,蛋白结合对象为RNA,RIP-seq即对富集得到的...
RNA免疫沉淀(RIP)* 实验原理 RIP(RNA Binding Protein Immunoprecipitation, RNA结合蛋白免疫沉淀)是研究体内 RNA 与蛋白结合情况的技术。 结合了抗体的磁珠或树脂(Beads)与样本裂解液孵育,通过”抗原-抗体“之间的免疫作用,诱饵蛋白被吸附在Beads上,与诱饵蛋白结合的RNA,也一起沉淀到Beads上。洗涤去掉未结合的RNA后,...
RIP技术基于免疫沉淀原理，旨在捕捉体内RNA结合蛋白（RBP）与其所结合的RNA。通过将特定的RBP及其结合的RNA一同沉淀下来，再利用qPCR或测序等方法对结合的RNA进行鉴定，从而揭示RNA-蛋白质相互作用的细节。若您已对IP、Co-IP、ChIP、RIP等免疫沉淀技术有所了解，那么接下来的内容将带您深入探索RIP的实验流程。实验流程 ...