在通过应激信号(如氨基酸饥饿)诱导自噬后,第一步是形成自噬体。LC3-I和LC3-II都存在于健康细胞中,但在自噬诱导后,LC3-II的比例随着与自噬体膜的结合而增加。 Cell Biolabs自噬ELISA检测试剂盒(LC3-II定量)使用选择性透化程序来去除胞浆pro-LC3和LC3-I,并保留自噬体膜结合的LC3-II。未知裂解物中LC3-II的量通...
另外,LC3也在线粒体自噬中也发挥作用,通过消除线粒体至基本水平来满足细胞能量需求并防止过量的ROS产生,从而调节线粒体的数量和质量。线粒体的自噬主要是通过PINK启动的,PINK 蛋白在健康状态下通过 PARL 的作用持续降解,而在线粒体损伤时, PARL受到抑制,PINK 稳定并招募 E3 连接酶 Parkin,以启动自噬。 师兄说:...
自噬病毒工具，便于直接感染目的细胞后直观地观察细胞自噬的整体水平。自噬单荧光标记慢病毒 吉满自主研发出单荧光(绿光或红光)标记的自噬指示产品，当细胞内没有自噬发生时，荧光-LC3融合蛋白会均匀地分散在细胞质中，一旦细胞发生自噬活动，荧光-LC3融合蛋白就会聚集并转位到自噬体膜，此时在荧光显微镜下可清晰地观察到...
LC3-I 通过 Atg7 和 Atg3(分别对应 E1 和 E2 样酶)参与的泛素样反应,使磷脂酰乙醇胺 (PtdEth,PE)偶联,生成脂质化形式的 LC3,也称作 LC3-II,它可以附着到自噬体(autophagosome)的膜上,是自噬体的结构蛋白。在降解过程中,位于自噬溶酶体外膜的 LC3-II 被半胱氨酸蛋白酶 Atg4B 移除后回收,位于内膜的 LC3-I...
目前用于观察自噬流变化的主流方法是LC3双荧光标记法,即细胞中同时带有RFP和GFP两种不同颜色的荧光蛋白与LC3蛋白融合,从而可以实时监测自噬体到自噬溶酶体的变化过程,监控自噬流。 其原理是:自噬体内腔pH值约为7,而溶酶体pH值约为4。自噬体与溶酶体融合后,腔室内pH降为4。利用GFP在酸性环境中淬灭、RFP则可以稳定...
艾美捷Cell Biolabs的细胞自噬ELISA试剂盒(LC3-II Quantation)是一种用于检测和定量培养细胞中LC3的酶免疫分析。该试剂盒利用选择性渗透程序去除胞浆前LC3和LC3-I,并保留自噬体膜结合的LC3-II(图1)。在固定和透化后,用抗LC3抗体探测含有LC3-II的细胞,然后用HRP缀合的第二抗体探测。每个试剂盒提供足够的试剂来进...
LC3是自噬形成标志物。 P62与经泛素化的蛋白结合,再与LC3-II蛋白结合形成复合物,并最终在溶酶体内降解,在自噬过程中P62会不断被消耗。 这三个蛋白是检测自噬的关键蛋白。 Frontiers in immunology 9 (2018): 1881. 应用Immunoway LC3B (YM3381) 其他检测方法...
线粒体自噬时,内质网膜包裹损伤的线粒体形成自噬体,此时LC3-I蛋白被修饰形成LC3-II蛋白,LC3-II蛋白促使自噬体与溶酶体融合,完成损伤的线粒体降解。研究人员选取周龄一致的大鼠随机分为对照组、中等强度运动组和大强度运动组。训练一段时间后,测量大鼠腓肠肌细胞LC3-I蛋白和LC3-II蛋白的相对含量,结果如下图。下列...
Cell Biolabs丨艾美捷 LC3-II定量自噬ELISA试剂 LC3是一种16-18kDa的小蛋白质,在细胞内以3种形式存在。125个氨基酸的前体形式被切割成120个氨基酸形式,称为LC3-I。与磷脂酰乙醇胺(PE)结合后,生成LC3-II形式。LC3-I主要存在于细胞质中,LC3-II主要存在于细胞膜部分。
自噬免疫印迹试剂盒(LC3-II检测)的产品建议保存条件:Upon receipt, store Anti-LC3 antibody and Secondary antibody at -20ºC. Store all other components at room temperature. 其他 Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈(San Diego),是著名的细胞学试剂品牌,作为最前沿的细胞学分析检...