LC3合成之后是前提LC3 pro-LC3;然后立刻C末端被ATG4水解切割掉一段多肽,暴露甘氨酸,这个是LC3-I,胞浆分布。自噬过程中,LC3-I在ATG7和ATG12-ATG5-ATG16L作用下(和泛素修饰过程很像),与磷脂酰乙醇胺共价结合,这个才是LC3-II,结合在自噬体膜上。LC-II由于磷脂酰乙醇胺的修饰,导致电荷的变化,使得迁移率更快,所...
自噬发生时，LC3 蛋白合成后立即在其羧基端被 Atg4 所剪切，产生细胞浆定位的 LC3-I。在自噬过程中，LC3-I 会被包括 Atg7 和 Atg3 在内的泛素样体系所修饰和加工，产生分子量为 14kD 的 LC3-II，并定位到自噬小体中。LC3-II 的含量和发生自噬的程度成正比，LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。得益...
c组,LC3-II 在 c 处理下表达升高,使用 Baf A1 后未见明显积聚,提示自噬被抑制。 LC3 检测的注意点 目前的 LC3 抗体所检测的抗原表位都位于 LC3 的 N 端,由于 PE 基团结合可能导致 N 端区域的构象变化,使得抗体对 LC3-II 的亲和性更高,所以 LC3-II 条带显色深并不能代表该样本处于高自噬状态。另外,LC...
师兄说一般LC3-II条带深可以表明自噬程度高,可以通过扫描条带的灰度,计算LC3-II/LC3-I表示自噬的水平。有时因为LC3-I条带较浅,LC3-II/LC3-I的比值存在较大的误差,因此也有科学家用LC3-II与内参的比值进行半定量,综合考察。 师兄说:自噬参与程度看组间差异 最后师兄又给了我一个灵魂打击,你这个对照组和实验...
图1:LC3的处理。在自噬过程中,前-LC3经历C末端蛋白水解形成LC3-I(胞浆)。LC3-I蛋白与磷脂酰乙醇胺(PE)结合并易位到自噬体膜(LC3-II)。选择性透化程序用于去除胞质前LC3/LC3-I并保留自噬体结合的LC3-II。LC3-II被用作自噬的特异性标记 试剂盒组成: ...
自噬相关蛋白LC3是什么 LC3I和LC3II有何区别 LC3是自噬标志物,自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低
LC3是一种16-18kDa的小蛋白质,在细胞内以3种形式存在。125个氨基酸的前体形式被切割成120个氨基酸形式,称为LC3-I。与磷脂酰乙醇胺(PE)结合后,生成LC3-II形式。LC3-I主要存在于细胞质中,LC3-II主要存在于细胞膜部分。 当应激信号如氨基酸饥饿诱导自噬时,步是自噬体的形成。在健康细胞中可以看到LC3-I和LC3-II...
在自噬过程中,LC3-I会被包括Atg7和Atg3在内的泛素样体系修饰和加工,与磷脂酰乙醇胺(PE)相偶联,形成LC3-II并定位于自噬体内外膜上。自噬体和溶酶体融合后,外膜上的LC3-II被Atg4切割,产生LC3-I循环利用;内膜上的LC3-II被溶酶体酶降解,导致自噬溶酶体中LC3含量很低(图6)。因此,可以通过荧光显微镜观察内源性...
细胞自噬是在一定条件下“吃掉”自身的结构和物质的过程,内质网膜包裹损伤的线粒体形成自噬体时,LC3-Ⅰ蛋白被修饰形成LC3-Ⅱ蛋白,LC3-II蛋白促使自噬体与溶酶体融合,完成损伤线粒体的降解。将大鼠随机分为对照组、中等强度运动组和高强度运动组,测量细胞中LC3-Ⅰ蛋白和LC3-Ⅱ蛋白的相对含量,结果如图所示。下列叙述...