LC3-II 的含量和发生自噬的程度成正比,LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。得益于荧光蛋白技术的发展,我们可以通过荧光蛋白标记的方式,直观的看到自噬现象和过程。自噬病毒工具,便于直接感染目的细胞后直观地观察细胞自噬的整体水平。自噬单荧光标记慢病毒 吉满自主研发出单荧光(绿光或红光)标记的自噬指示产品...
由于LC3是脂化和膜相关蛋白,在细胞裂解时,可在冰上短暂超声,以促进蛋白溶解,使得LC3顺利从膜上解离。此外,LC3-II的分子量约16KD,LC3-I在电泳后停留在14KD处,两者均为小分子量蛋白,且差距仅2KD。因此在WB时要注意使用高浓度分离胶进行分离(建议约15%),转膜时使用小孔径0.2um的NC膜,采用恒流200mA,转膜40min...
内质网膜包裹损伤的线粒体形成自噬体,此时LC3I蛋白被修饰形成LC3II蛋白,LC3II蛋白促使自噬体与溶酶体融合,完成损伤的线粒体降解。研究人员选取周龄一致的大鼠随机分为对照组、中等强度运动组和大强度运动组。训练一段时间后,测量大鼠腓肠肌细胞LC3I蛋白和LC3II蛋白的相对含量,结果如下图。下列叙述不正确的是( ) A...
然后被APG7L / ATG7激活,转移至ATG3并偶联脂酰乙醇胺(PE)以形成膜结合形式LC3-II它可以附着到自噬体(autophagosome)的膜上,是自噬体的结构蛋白。怪不得文献中涉及自噬的都会做LC3-I和LC3-II。 另外,LC3也在线粒体自噬中也发挥作用,通过消除线粒体至基本水平来满足细胞能量需求并防止过量的ROS产生,从而调节线粒...
LC3,全称为自噬相关蛋白LC3,是细胞内自噬过程中的关键标志物。当细胞需要进行自噬,即分解自身结构以回收利用物质时,胞浆中的LC3-I会被一种酶水解一小段肽链,转变成LC3-II。LC3-II与LC3-I的比例变化反映了细胞自噬的活跃程度。LC3-I在胞浆中分布,而LC3-II则通过与磷脂酰乙醇胺的共价结合,附着...
LC-II由于磷脂酰乙醇胺的修饰,导致电荷的变化,使得迁移率更快,所以SDS-PAGE中显得分子量比LC3-I小...
[分析]分析题图可知:LC3-II蛋白促使自噬体与溶酶体融合,完成损伤的线粒体降解,实验数据显示随运动强度增大,LC3-II的含量增加。 [详解]A,内质网膜包裹损伤的线粒体形成自噬体,与溶酶体融合依赖膜的流动性,A正确. B,根据柱形图分析,运动强度增大,LC3-Ⅰ蛋白被修饰形成LC3-Ⅱ蛋白,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值增大,B正...
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细胞自噬是在一定条件下“吃掉”自身的结构和物质的过程,内质网膜包裹损伤的线粒体形成自噬体时,LC3-I蛋白被修饰形成LC3-II蛋白,LC3-II蛋白促使自噬体与溶酶体融合,完成损伤线粒体的降解。将大鼠随机分为对照组、中等强度运动组和高强度运动组,测量细胞中LC3-I蛋白和LC3-II蛋白的相对含量,结果如图所示。下列叙述不...
利用Western Blot检测LC3-II/I比值的变化以评价细胞自噬形成。细胞自噬形成时,胞浆型LC3-I会酶解掉一小段多肽,随后跟PE结合转变为膜型的LC3-II。因此可以通过LC3-II/I比值的大小估计细胞自噬水平的高低。 图1. WB检测LC3和p62蛋白表达示意图 (Yoshii, S.R. and N. Mizushima. Int J Mol Sci, 2017.) ...