自噬发生时,LC3 蛋白合成后立即在其羧基端被 Atg4 所剪切,产生细胞浆定位的 LC3-I。在自噬过程中,LC3-I 会被包括 Atg7 和 Atg3 在内的泛素样体系所修饰和加工,产生分子量为 14kD 的 LC3-II,并定位到自噬小体中。LC3-II 的含量和发生自噬的程度成正比,LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。得益...
师兄说一般LC3-II条带深可以表明自噬程度高,可以通过扫描条带的灰度,计算LC3-II/LC3-I表示自噬的水平。有时因为LC3-I条带较浅,LC3-II/LC3-I的比值存在较大的误差,因此也有科学家用LC3-II与内参的比值进行半定量,综合考察。 师兄说:自噬参与程度看组间差异 最后师兄又给了我一个灵魂打击,你这个对照组和实验...
在自噬过程中,LC3-I会被包括Atg7和Atg3在内的泛素样体系修饰和加工,与磷脂酰乙醇胺(PE)相偶联,形成LC3-II并定位于自噬体内外膜上。自噬体和溶酶体融合后,外膜上的LC3-II被Atg4切割,产生LC3-I循环利用;内膜上的LC3-II被溶酶体酶降解,导致自噬溶酶体中LC3含量很低(图6)。因此,可以通过荧光显微镜观察内源性...
因此,LC3-II是自噬流程中的重要标志。LC3-II还与自噬相关蛋白如Atg5、Atg7等蛋白质的相互作用协同推动自噬的进行。 三、LC3双荧光自噬流原理 为了研究自噬的动态过程,科学家发展出了LC3双荧光自噬流技术。这一技术基于LC3蛋白家族在自噬过程中的表达和转变特点,通过转染细胞并观察LC3蛋白家族的荧光标记来实现。 LC3双...
LC3-I主要存在于细胞质中,LC3-II主要存在于细胞膜部分。 当应激信号如氨基酸饥饿诱导自噬时,步是自噬体的形成。在健康细胞中可以看到LC3-I和LC3-II,但在自噬诱导后,LC3-II的比例随着其与自噬体膜的结合而增加。 Cell Biolabs 艾美捷 自噬ELISA试剂盒(LC3-II定量)使用选择性渗透程序去除细胞溶质pro-LC3和LC3-I,...
LC3是自噬标志物,自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。pro-LC3;立刻C末端被ATG4水解切割掉一段多肽,暴露甘氨酸,这个是LC3-I,胞浆分布。自噬过程中,LC3-I在ATG7和ATG12-ATG5-ATG16L作用下(...
在自噬过程中,LC3-I 会被包括 Atg7 和 Atg3(分别对应 E1 和 E2 样酶)在内的泛素样体系修饰和加工,与磷脂酰乙醇胺(PE)相偶联,形成 LC3-II 附着到自噬体的膜上,是自噬体的结构蛋白。在自噬体和溶酶体融合后,位于外膜上的 LC3-II...
LC3(Microtubule-associated protein light chain 3)蛋白是自噬过程中的一个关键分子,它可以作为自噬小体的特异性标记物。在自噬过程中,LC3蛋白从非修饰形式(LC3-I)转化为修饰形式(LC3-II),并参与自噬小体的形成和界定。LC3双荧光自噬流技术就是通过标记LC3蛋白的N端和C端分别与GFP和RFP结合来追踪自噬小体的形成...
在通过应激信号(如氨基酸饥饿)诱导自噬后,第一步是形成自噬体。LC3-I和LC3-II都存在于健康细胞中,但在自噬诱导后,LC3-II的比例随着与自噬体膜的结合而增加。 Cell Biolabs自噬ELISA检测试剂盒(LC3-II定量)使用选择性透化程序来去除胞浆pro-LC3和LC3-I,并保留自噬体膜结合的LC3-II。未知裂解物中LC3-II的量通...