LC3 是酵母菌中自噬基因ATG8在哺乳动物中的同源蛋白,与ATG12-ATG5 相比,LC3-II 除了定位在自噬体形成起始阶段的隔离膜上,也存在于自噬过程中其它各阶段自噬体的内外膜上。LC3-II 的分子量大于LC3-I,分子间存在极强的疏水作用力,SDS-PAGE 电泳时LC3-II 涌动的速度比LC...
自噬发生时,LC3 蛋白合成后立即在其羧基端被 Atg4 所剪切,产生细胞浆定位的 LC3-I。在自噬过程中,LC3-I 会被包括 Atg7 和 Atg3 在内的泛素样体系所修饰和加工,产生分子量为 14kD 的 LC3-II,并定位到自噬小体中。LC3-II 的含量和发生自噬的程度成正比,LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。得益...
师兄说一般LC3-II条带深可以表明自噬程度高,可以通过扫描条带的灰度,计算LC3-II/LC3-I表示自噬的水平。有时因为LC3-I条带较浅,LC3-II/LC3-I的比值存在较大的误差,因此也有科学家用LC3-II与内参的比值进行半定量,综合考察。 师兄说:自噬参与程度看组间差异 最后师兄又给了我一个灵魂打击,你这个对照组和实验...
在自噬过程中,LC3-I 会被包括 Atg7 和 Atg3(分别对应 E1 和 E2 样酶)在内的泛素样体系修饰和加工,与磷脂酰乙醇胺(PE)相偶联,形成 LC3-II 附着到自噬体的膜上,是自噬体的结构蛋白。在自噬体和溶酶体融合后,位于外膜上的 LC3-II...
故选C。 分析总结。 题目线粒体自噬时内质网膜包裹损伤的线粒体形成自噬体此时lc3i蛋白被修饰形成lc3ii蛋白lc3ii蛋白促使自噬体与溶酶体融合完成损伤的线粒体降解反馈 收藏
在自噬过程中,LC3-I会被包括Atg7和Atg3在内的泛素样体系修饰和加工,与磷脂酰乙醇胺(PE)相偶联,形成LC3-II并定位于自噬体内外膜上。自噬体和溶酶体融合后,外膜上的LC3-II被Atg4切割,产生LC3-I循环利用;内膜上的LC3-II被溶酶体酶降解,导致自噬溶酶体中LC3含量很低(图6)。因此,可以通过荧光显微镜观察内源性...
自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),因此可利用WB检测LC3-II/I比值的变化以评估自噬的强弱。此外自噬衔接物如sequestosome 1(SQSTM1,也称为p62)也可用于检测自噬,p62蛋白水平的多少与自噬强弱有着反比例关系。2.3荧光蛋白标记检测 2.3.1 GFP-LC3 ...
图1:LC3的处理。在自噬过程中,前-LC3经历C末端蛋白水解形成LC3-I(胞浆)。LC3-I蛋白与磷脂酰乙醇胺(PE)结合并易位到自噬体膜(LC3-II)。选择性透化程序用于去除胞质前LC3/LC3-I并保留自噬体结合的LC3-II。LC3-II被用作自噬的特异性标记 试剂盒组成: ...
LC3家族成员在自噬体的成熟过程中发挥关键作用,其中自噬体是自噬的核心细胞器5。扩散分布在胞质溶胶中的LC3前体经蛋白水解加工后形成LC3-I。在自噬开始时,通过在其C-末端甘氨酸修饰磷脂酰乙醇胺以形成LC3-II,其以点状分布的形式快速易位至新生自噬体上。LentiBrite™ LC3慢病毒颗粒提供明亮的GFP/RFP荧光和精确的...