自噬发生时，LC3 蛋白合成后立即在其羧基端被 Atg4 所剪切，产生细胞浆定位的 LC3-I。在自噬过程中，LC3-I 会被包括 Atg7 和 Atg3 在内的泛素样体系所修饰和加工，产生分子量为 14kD 的 LC3-II，并定位到自噬小体中。LC3-II 的含量和发生自噬的程度成正比，LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。得益...
📚 在解读LC3结果时,首先要记住一个关键原则:LC3II的增加并不一定意味着自噬流的增强。它可能只是表明胞浆内自噬小体的积累,这可能是由于自噬前期的生成增多,或者是自噬后期的降解被阻滞。同样,LC3II的减少也不一定意味着自噬流的抑制。它可能只是表明胞浆内自噬小体的减少,这可能是由于自噬前期的生成减少,或者是...
首先与需降解的胞质成分集结在一起，然后隔离膜延伸并包裹封闭胞浆成分形成一个双层膜的结构即自噬体(au...
自噬形成时，胞浆型LC3（即LC3-I）会酶解掉一小段多肽，转变为（自噬体）膜型（即LC3-II），因此可利用WB检测LC3-II/I比值的变化以评估自噬的强弱。此外自噬衔接物如sequestosome 1（SQSTM1，也称为p62）也可用于检测自噬，p62蛋白水平的多少与自噬强弱有着反比例关系。2.3荧光蛋白标记检测 2.3.1 GFP-LC3 ...
还是先查查LC3再做吧,LC3是一种蛋白轻链3,是自噬过程的标志物。它的功能主要参与了自噬小体的形成, LC3前体分子被ATG4B剪去C端的5肽,裂解形成胞质形式LC3-I。然后被APG7L / ATG7激活,转移至ATG3并偶联脂酰乙醇胺(PE)以形成膜结合形式LC3-II它可以附着到自噬体(autophagosome...
LC3-II 的含量和发生自噬的程度成正比,LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。 得益于荧光蛋白技术的发展,我们可以通过荧光蛋白标记的方式,直观的看到自噬现象和过程。自噬病毒工具,便于直接感染目的细胞后直观地观察细胞自噬的整体水平。 自噬单荧光标记慢病毒 吉满自主研发出单荧光(绿光或红光)标记的自噬指示产品...
WB常见指标——自噬标志物LC3 WB常见指标——⾃噬标志物LC3 摘要 LC3特点实验要点 LC3A/B/C有细胞/组织类型分布特点查询细胞/组织中各亚型的表达谱，选择合适靶 标的抗体 LC3-I可转变为LC3-II检测LC3-I和LC3-II使⽤LC3A，LC3B或者 LC3A/B的抗体均可。脂化、膜相关蛋⽩超声确保充分裂解 ⼩分⼦量蛋...
线粒体自噬时,内质网膜包裹损伤的线粒体形成自噬体,此时LC3-I蛋白被修饰形成LC3-II蛋白,LC3-II蛋白促使自噬体与溶酶体融合,完成损伤的线粒体降解。研究人员选取周龄一致的大鼠随机分为对照组、中等强度运动组和大强度运动组。训练一段时间后,测量大鼠腓肠肌细胞LC3-I蛋白和LC3-II蛋白的相对含量,结果如下图。下列...
而通常认为LC3-II的蛋白含量与自噬程度成正比。3. 自噬溶酶体的形成：自噬体与溶酶体的融合是自噬过程的最后阶段，这一过程需要主要是LAMP1、Rab7、UVRAG等蛋白的参与，通过形成复合物促进自噬体与溶酶体的融合，形成自噬溶酶体，最后通过其中的水解酶对内容物降解，产生的小分子物质，被运送到细胞质中重新参与细胞...
在自噬中「出现又离开」 LC3/Atg8 被 Atg4 剪切掉 C 端 5 肽,暴露甘氨酸残基,产生定位于胞浆的 LC3-I。在自噬过程中,LC3-I 会被包括 Atg7 和 Atg3(分别对应 E1 和 E2 样酶)在内的泛素样体系修饰和加工,与磷脂酰乙醇胺(PE)...