一、A549肺癌细胞是贴壁上皮细胞,通过人A549肺癌细胞系稳定表达两种可诱导的报道基因,目前DELF生物目前从事该细胞的基因编辑包含了对MAVS、MD a5、RIG-I等基因的敲除,稳定过表达ACE2受体等。A549细胞系是哮喘、过敏和呼吸道感染的良好表征的细胞模型。 二、B16黑色素瘤细胞来源于C57BL/6来源的鼠B16黑色素瘤细胞系,...
基因编辑小鼠的研究中,基因型鉴定环节至关重要,它涉及到了方案设计、PCR引物选择和DNA提取等,细节上的疏忽便可能导致结果天壤之别。什么时候是进行基因型鉴定的最佳时机?实验组和对照组要怎么设置?又该如何提高实验的效率和准确率?针对基因编辑小鼠的三大技术路线,如
KI小鼠: 基因敲入KI(knock-in)小鼠,是在目的基因位置引进特定的突变或外源基因,或将报告基因通过同源重组的方式引入目的基因的特定位点,从而可以通过报告基因的表达跟踪目标基因的表达～总而言之就是加点基因从此鼠生不一样。 下面就是ES细胞打靶KI模型的策略,是不是和ES细胞打靶KO模型很像。 不仅策略像,繁育路线也...
1）退而求其次。如果基因彻底敲除后会导致细胞死亡，可以通过RNAi降低基因的表达观察是否有表型变化。如果基因敲低有表型，发文一般没问题。RNAi文献案例：通过RNAi方法下调 MTA1的表达，可以导致ER α在ER阴性乳腺癌细胞系 MDA-MB-231中重新表达，并降低 MMP-9 和 CyclinD1 的蛋白水平，以及减少肿瘤细胞侵袭和增殖...
第 2 种加大范围筛选法,只适合部分致死率较低的基因,不确定性较高,时间和费用成本也比较高。第 3 种条件性敲除策略费用最高,tet - off系统也可能存在部分背景表达的情况, KI 的方法则难度较高。总的来说,可以结合时间、经费和具体基因进行方案选择。
第2种加大范围筛选法,只适合部分致死率较低的基因,不确定性较高,时间和费用成本也比较高。第3种条件性敲除策略费用最高,tet-off系统也可能存在部分背景表达的情况,KI的方法则难度较高。总的来说,可以结合时间、经费和具体基因进行方案选择。
基因编辑小鼠主要分为基因敲除(KO)、条件性敲除(CKO)及基因敲入(KI)等几种方式。其中基因敲除鼠(KO)是基因编辑鼠中最常用、也是最容易构建的模型鼠，但是这样一种模型鼠的设计和构建过程依然复杂。本文就以CRISPR/Cas9技术为例，为大家科普一下基因敲除鼠的设计、构建、鉴定与使用方法。1基因敲除原理基因敲除技术是...
马上订购,还有KO细胞免费送! CRISPR-U™是源井生物自主研发的基因编辑技术(基于CRISPR/Cas9技术),CRISPR-U™的基因切割效率更高,同时可以大幅度提升同源重组效率,轻松实现基因点突变(PM)和基因敲入(KI)。 源井生物集5000多例基因编辑大数据,生物信息学和IT信息能力,重磅打造的基因编辑自动方案免费系统—— 红棉...
基因编辑小鼠主要分为基因敲除(KO)、条件性敲除(CKO)及基因敲入(KI)等几种方式。其中基因敲除鼠(KO)是基因编辑鼠中最常用、也是最容易构建的模型鼠,但是这样一种模型鼠的设计和构建过程依然复杂。本文就以CRISPR/Cas9技术为例,为大家科普一下基因敲除鼠的设计、构建、鉴定与使用方法。
基因编辑小鼠主要分为基因敲除(KO)、条件性敲除(CKO)及基因敲入(KI)等几种方式。其中基因敲除鼠(KO)是基因编辑鼠中最常用、也是最容易构建的模型鼠,但是这样一种模型鼠的设计和构建过程依然复杂。本文就以CRISPR/Cas9技术为例,为大家科普一下基因敲除鼠的设计、构建、鉴定与使用方法。