由于该产品中的质粒实现了GFP连接的Cas9表达盒,荧光激活细胞分选(FACS)可用于分离Cas9诱导修饰频率显著增加的细胞群(图2)。这种FACS富集方法在递送效率和/或Cas9表达水平低或检测不到的情况下特别有用。此外,GFP共表达方法比替代性报告载体更有优势,包括: a) Cas9-GFP连接的表达不需要额外的步骤将人工靶位点克隆到...
因此GFP灵敏度可能低于某些酶类报告蛋白,比如萤火虫荧光素酶等。
首先,Cas9是一种关键的核酸内切酶,用于在CRISPR系统中进行基因编辑。它需要特定的向导RNA来指导其在DNA序列上的精确切割。与此同时,puro/gfp作为标记元件,通常用于筛选或标记成功表达Cas9的细胞。在这种情况下,插入序列的作用在于将Cas9和标记元件整合在一起。为了解决这一问题,科学家们引入了多顺反子...
2A序列:Cas9蛋白后接有2A序列,这是一种自切割肽序列,能够确保Cas9蛋白和下游的GFP蛋白在翻译过程中被分离。 GFP报告基因:载体包含EGFP(增强型绿色荧光蛋白)作为报告基因,用于监测细胞转染效率和基因编辑效果。 sgRNA表达:载体包含U6启动子驱动的sgRNA表达框架,U6启动子是RNA聚合酶II型启动子,专门用于驱动小RNA的表达。
细胞名称:GFP标记的人慢性髓原白血病细胞Cas9稳定表达细胞系 细胞简称:K-562-Cas9-GFP 产品货号:TCH-C226-M01 修饰基因:Cas9, EGFP 修饰类型:过表达稳转 转导方法:质粒电转 抗性基因:Puro 细胞鉴定:荧光拍照 种属来源:人 组织来源:骨髓 疾病特征:慢性骨髓性白血病 ...
Gene Snipper™Cas9 GFP空NLS产品是Cas9 Null Mutant NLS fused to GFP for visual confirmation of transfection as well as subsequent verification of Cas9 clearance from the cells.
载体名称:pCas9-GFP 或 pCas9_GFP 质粒类型:CRISPR/Cas9载体;基因敲除载体;哺乳动物细胞载体;双顺反子载体 高拷贝/低拷贝:高拷贝 插入位点:限制性内切酶,多克隆位点 启动子:CBh 载体大小:9271 bp 5' 测序引物及序列:ggctctagtgcctctgctaacc 3' 测序引物及序列:M13 Reverse:CAGGAAACAGCTATGAC ...
产品摘要:CRISPR CAS9 质粒套装 pX458 (GFP)和 pX459 V2.0 (puro) 店铺主推品 热销潜力款 支付方式: 支付宝微信银行转账 产品完善度:访问次数:5357 产品分类 品牌分类 哺乳动物表达质粒 抗体表达质粒 双分子荧光互补 自噬质粒 酵母 植物 昆虫 质粒
pACT1:Cas9-GFP, U6:sgTK 价格: ¥1000 编号:BNCC353593 形式:质粒干粉 交付:一至三天 品牌:BNCC 用途: 科研 加入购物车 查看购物车 基本信息 相关资源 pACT1:Cas9-GFP, U6:sgTK基本信息 培养基 酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃) 生长条件 LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株Stbl...
peSpCas9-GFP序列是一个大肠杆菌表达载体,Tac强启动子可以驱动GST促溶标签和目的基因融合表达,LacI阻碍蛋白和Laco操作子使本质粒在没有加入IPTG之前禁止表达,防止其影响细菌生长。表达后的融合蛋白可用凝血酶蛋白酶切割,再过一次GST柱子即可清除掉GST标签。 产品相册peSpCas9-GFP序列CTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAAC...