a) Cas9-GFP连接的表达不需要额外的步骤将人工靶位点克隆到替代报告质粒中。 b)转染的dsDNA总量减少。 在许多情况下,某些细胞类型对高剂量的dsDNA敏感,将替代报告质粒形式的额外dsDNA添加到现有的CRISPR和供体载体构建体中可导致细胞毒性。 c)通过Cas9-GFP mRNA、体外转录的gRNA和单链寡核苷酸(ssODN)可以选择使用“不...
筛选标记: GFP 克隆菌株: Stbl3 培养条件: LB/37℃ 质粒简介 pME—Cas9—T2A—GFP哺乳细胞基因编辑质粒 pME—Cas9—T2A—GFP哺乳细胞基因编辑质粒使用说明: 1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min; 2、从—80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记; 3...
质粒信息: pSaCas9_GFP哺乳编辑质粒 宿主分类:哺乳细胞质粒 启动子:CMV 分类:哺乳细胞质粒 质粒相关图谱、序列及其他内容可查询公司官司网 电话:17317861055 QQ:570992151 收到质粒干粉后请先短暂离心,再加入20ul dd
pACT1:Cas9-GFP, U6:sgTK 价格: ¥1000 编号:BNCC353593 形式:质粒干粉 交付:一至三天 品牌:BNCC 用途: 科研 加入购物车 查看购物车 基本信息 相关资源 pACT1:Cas9-GFP, U6:sgTK基本信息 培养基 酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃) 生长条件 LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株Stbl...
为了利用CRISPR/Cas9方法在红色毛癣菌中进行基因敲除,我们使用两种不同的质粒pCas9GFP(表达eGFP标记的Cas9核酸酶,Cas9GFP)和psgRNA5.0(表达基因特异性sgRNAs)来靶向pacC基因(Figure1)。本文设计了四种不同的sgRNA:与pacC外显子1互补的sgRNA-1和sgR...
,稀释密度一般为50~90个细胞/板(图7),若编辑效率达50%以上,推荐分两块96孔板即可,最终选取20-30个单克隆以得到成功敲除的细胞系;也可以将细胞铺到100mm皿里,一周后挑取单克隆(注:这种方法适合单细胞不易成活的细胞系,但是挑取的单克隆偶尔不纯,有时需要重新亚克隆);若载体带有GFP等荧光标记,还...
中文名称:基因敲除质粒英文名称:cas9 保存条件:-20纯度规格:99.99% 产品类别:动物模型(🡳点击咨询🡳) 广州吉妮欧生物科技有限公司致力于生物医药领域的技术研发与生物试剂的销售,力求为中国广大生物科技研究者提供质最快捷的贴心服务。公司的SPF 级动物实验平台,提供从普通大小鼠到免疫缺陷鼠(裸鼠、NOD/SCID、NSG)...
使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System (Mirus Bio) 或TransIT®-mRNA Transfection Kit (Mirus Bio)转染试剂将靶向PPIB的gRNA和编码Cas9的质粒(pCas9-GFP; MilliporeSigma)或mRNA(5-甲基胞苷和假尿苷修饰,TriLink BioTechnologies)共转染到几种不同的哺乳...
pLV3-U6-MCS-shRNA质粒载体 pET-61-DEST(低拷贝)质粒载体 pSIN-Neo质粒载体 PiggyBac-CMV-MCS-Hyg质粒载体 pCXUN-HA质粒载体 pRetroX-TetOne-Puro质粒载体 ppyCAG-MCS-IRES-Hyg质粒载体 pCMV6-EGFP-MCS-Myc-Neo质粒载体 pLV3-U6-MCS-sgRNA-Neo质粒载体 pCW57 MCS1-P2A-MCS2(GFP)质粒载体 pLV-EF1a-MCS...
在这项研究中,研究人员选择了一个非小细胞肺癌的细胞系——KPD,然后借助慢病毒载体,将融合有GFP的Cas9基因序列整合到该细胞系基因组中,构建出Cas9-GFP-KPD细胞系。接下来研究人员将之前构建的mGecKoa文库(包括67, 405个sgRNA分别靶向20, 611个基因和1175个microRNA)仍然以慢病毒的形式转导入Cas9-GFP KPD细胞系...