Flp-In™-CV-1、Flp-In™-293、Flp-In™-CHO 和 Flp-In™ Jurkat 细胞系(图1)与表达 CMV 启动子基因的 Flp-In™ 载体(pcDNA™5/FRT、pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO™ 和 pSecTag/FRT/V5-His-TOPO™)配合使用。Flp-In™-BHK 和 Flp-In™-3T3 细胞往往会下调 CMV 启动子。因此,建议将...
利用Flp-In™ T-REx™ 系统可生成从特定基因组位置进行四环素诱导性目标基因表达的稳定哺乳动物细胞系。为生成这些细胞系,使用 Flp-In™ T-REx™ 系统时包含以下主要步骤: 将两种质粒独立地整合到所选哺乳动物细胞系的基因组中,生成...
Flp-In™-CV-1,Flp-In™-293,Flp-In™-BHK,Flp-In™-Jurkat和Flp-In™-3T3细胞系是通过用pFRT / 紫胶Zeo并选择稳定的抗Zeocin™的克隆。通过用pFRT / lac Zeo2 转染CHO细胞并选择抗Zeocin™的克隆来创建Flp-In™-CHO细胞系。Flp-In™T-REx™-293细胞系包含稳定整合的pFRT / lac ...
在创建一个稳定的flp-in细胞系表达目的基因之前,首先需要创建一个包含完整的frt位点稳定的哺乳动物细胞系,而pfrt/laczeo质粒整合到基因组中是随机的,这样frt整合的位点可能是一个或多个。基因组中如果存在多个整合的frt位点可能会增加染色体重排或意外重组事件的发生,从而影响目的基因的表达和功能研究。所以对完整的...
摘要 本发明涉及表达牛γ干扰素的Flp-In-293细胞系,该细胞系命名为B1,含有编码牛γ干扰素的基因。构建细胞系B1的方法是:将序列正确的preBoIFN-γ片段构建成重组质粒pcDNA5/FRT-preBoIFN-γ-FLAG,采用脂质体转染法将重组质粒pcDNA5/FRT-preBoIFN-γ-FLAG与重组酶表达载体pOG44共转染Flp-In-293细胞,使用含120μg...
专利名称 一种检测Flp-In宿主细胞系中FRT位点拷贝数的引物组、试剂盒及方法 申请号 2021101642227 申请日期 2021-02-05 公布/公告号 CN112725424B 公布/公告日期 2021-11-02 发明人 焦顺昌,张嵘,卫静,袁翰 专利申请人 北京鼎成肽源生物技术有限公司,焦顺昌 专利代理人 董大媛 专利代理机构 北京高沃律师事务...
Flp-In CHO细胞系(POR-Flp-In CHO).该文构建了pcDNA5/FRT-CYP2A13重组质粒,利用Lipofectamine^(TM) 2000转染试剂将pcDNA5/FRT-CYP2A13重组质粒分别转染到Flp-In CHO细胞和POR-Flp-In CHO细胞中.通过荧光定量PCR(qRT-PCR),Western blot和黄曲霉素B1(AFB1)/4-甲基亚硝胺-1-3-吡啶基-1-丁酮(NNK)细胞毒...
结果:和转染pcDNA5/FRT空质粒的Flp-In^(TM)CHO细胞相比,转染各CYP2A13野生型和各突变体的CHO细胞中CYP2A13 mRNA和蛋白表达水平增加,对AFB1毒性敏感度增加(P<0.05)。结论:成功建立了稳定表达CYP2A13*1、*2、*5、*6、*8和*9 Flp-In^(TM)CHO细胞系。
Flp-In ™ 293 T-REx 细胞系设计用于快速生成稳定细胞系,确保通过 Flp-In™ 表达载体对您的目标蛋白质进行均一表达。这些细胞在转录活性基因组基因座处包含一个稳定整合的 FRT 位点。Flp-In™ 表达载体的靶向整合可确保您的目的基因高水平表达。Flp-In™ T-REx™-293 细胞系含有稳定整合的 pFRT⁄...
Flp-In™-CV-1、Flp-In™-293、Flp-In™-CHO 和 Flp-In™ Jurkat 细胞系(图 1)与表达 CMV 启动子基因的 Flp-In™ 载体(pcDNA™5/FRT、pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO™ 和 pSecTag/FRT/V5-His-TOPO™)配合使用。Flp-In™-BHK 和 Flp-In™-3T3 细胞往往会下调 CMV 启动子。因此,建议...