Flp-In™-CHO 细胞系 SDS Invitrogen™ Flp-In™-CHO 细胞系 Flp-In™ 细胞系设计用于快速生成稳定细胞系以从 Flp-In™ 表达载体表达关注的蛋白。这些细胞在转录活性基因组基因座处包含一个稳定整合的 FRT 位点。Flp-In™ 表达载体的靶向整合可确保您的目的基因高水平表达。有六种了解更多信息...
为生成 Flp-In™ T-REx™ 宿主细胞系,您需将两种质粒先后转染到所选哺乳动物细胞系中: pFRT/lacZeo 靶标位点载体:pFRT/lacZeo 载体包含 lacZ-Zeocin™ 融合基因,其表达受到 SV40 早期启动子的控制。已插入的 FRT 位点刚好位于 ...
Flp-In™-CV-1,Flp-In™-293,Flp-In™-BHK,Flp-In™-Jurkat和Flp-In™-3T3细胞系是通过用pFRT / 紫胶Zeo并选择稳定的抗Zeocin™的克隆。通过用pFRT / lac Zeo2 转染CHO细胞并选择抗Zeocin™的克隆来创建Flp-In™-CHO细胞系。Flp-In™T-REx™-293细胞系包含稳定整合的pFRT / lac ...
在创建一个稳定的flp-in细胞系表达目的基因之前,首先需要创建一个包含完整的frt位点稳定的哺乳动物细胞系,而pfrt/laczeo质粒整合到基因组中是随机的,这样frt整合的位点可能是一个或多个。基因组中如果存在多个整合的frt位点可能会增加染色体重排或意外重组事件的发生,从而影响目的基因的表达和功能研究。所以对完整的...
本发明的目的是建立高效稳定表达牛Y干扰素的Flp-h-293细胞系。本发明所述的细胞系,是以Flp-h-293为宿主细胞,在Flp-h_293细胞FRT位点通过Flp/FRT位点特异性重组,使BoIFN- γ基因整合到Flp-h_293细胞基因组中而获得。 所以本发明所述的表达牛Y干扰素的Flp-h-293细胞系,是含有编码牛γ干扰素基因BoIFN-Y的Flp...
Flp-In CHO细胞系(POR-Flp-In CHO).该文构建了pcDNA5/FRT-CYP2A13重组质粒,利用Lipofectamine^(TM) 2000转染试剂将pcDNA5/FRT-CYP2A13重组质粒分别转染到Flp-In CHO细胞和POR-Flp-In CHO细胞中.通过荧光定量PCR(qRT-PCR),Western blot和黄曲霉素B1(AFB1)/4-甲基亚硝胺-1-3-吡啶基-1-丁酮(NNK)细胞毒...
结果:和转染pcDNA5/FRT空质粒的Flp-In^(TM)CHO细胞相比,转染各CYP2A13野生型和各突变体的CHO细胞中CYP2A13 mRNA和蛋白表达水平增加,对AFB1毒性敏感度增加(P<0.05)。结论:成功建立了稳定表达CYP2A13*1、*2、*5、*6、*8和*9 Flp-In^(TM)CHO细胞系。
专利权项:1.一种检测Flp-In宿主细胞系中FRT位点拷贝数的引物组,其特征在于,包括检测LAC基因的引物对和检测内参基因的引物对;所述内参基因为人类基因SYNCRIP的内含子UCR;所述内参基因在NCBI数据库中的序列号为NG_031848.1;所述检测LAC基因的引物对包括的正向引物LAC13-F和反向引物LAC13-R,核苷酸序列分别如SEQIDNo...
Flp-In™-CV-1、Flp-In™-293、Flp-In™-CHO 和 Flp-In™ Jurkat 细胞系(图 1)与表达 CMV 启动子基因的 Flp-In™ 载体(pcDNA™5/FRT、pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO™ 和 pSecTag/FRT/V5-His-TOPO™)配合使用。Flp-In™-BHK 和 Flp-In™-3T3 细胞往往会下调 CMV 启动子。因此,建议...
Flp-In™-CV-1、Flp-In™-293、Flp-In™-CHO 和 Flp-In™ Jurkat 细胞系(图 1)与表达 CMV 启动子基因的 Flp-In™ 载体(pcDNA™5/FRT、pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO™ 和 pSecTag/FRT/V5-His-TOPO™)配合使用。Flp-In™-BHK 和 Flp-In™-3T3 细胞往往会下调 CMV 启动子。因此,建议...