Flp-In™-CV-1、Flp-In™-293、Flp-In™-BHK、Flp-In™-Jurkat 和 Flp-In™-3T3 细胞系的形成过程是利用 pFRT/lacZeo 转染亲本细胞系,并选择用于稳定 Zeocin™ 抗性克隆。Flp-In™-CHO 细胞系的形成过程是利用 pFRT/lacZeo2 转染 CHO 细胞,并选择用于 Zeocin™ 抗性克隆。Flp-In™ T-...
Flp-In™ 系统 Flp-In™系统使您可以稳定整合和表达感兴趣的基因,以提供单拷贝等基因细胞系。Flp-In™表达会在您选择的哺乳动物细胞系基因组中引入一个Flp重组靶标(FRT)位点。随后,包含您感兴趣的基因的表达载体会通过FRT位点的Flp重组酶介导DNA重组,整合...
Flp-In™-CV-1,Flp-In™-293,Flp-In™-BHK,Flp-In™-Jurkat和Flp-In™-3T3细胞系是通过用pFRT / 紫胶Zeo并选择稳定的抗Zeocin™的克隆。通过用pFRT / lac Zeo2 转染CHO细胞并选择抗Zeocin™的克隆来创建Flp-In™-CHO细胞系。Flp-In™T-REx™-293细胞系包含稳定整合的pFRT / lac ...
在Flp-In母细胞中共转pcDNA5/FRT和pOG44质粒,构建出Flp-In表达细胞株; 检测目的基因的表达。 Flp-In™母细胞株构建: BioVector NTCC Inc.从Invitrogen公司购得Flp-In™-293、Flp-In™-CV-1、Flp-In™-CHO、Flp-In™-BHK、Flp-In™-3T3、Flp-In™-Jurkat,节约客户的时间,同时也提供其他细胞上...
In CHO细胞系(POR-Flp-In CHO).该文构建了pcDNA5/FRT-CYP2A13重组质粒,利用Lipofectamine^(TM) 2000转染试剂将pcDNA5/FRT-CYP2A13重组质粒分别转染到Flp-In CHO细胞和POR-Flp-In CHO细胞中.通过荧光定量PCR(qRT-PCR),Western blot和黄曲霉素B1(AFB1)/4-甲基亚硝胺-1-3-吡啶基-1-丁酮(NNK)细胞毒实验...
重组人凝血因子Ⅶ在Flp-In-CHO细胞中的表达及鉴定
利用Flp/FRT位点特异性重组技术,在Flp—In—CHO细胞中表达重组人凝血因子VII(rhFVII),并进行鉴定。方 法 用限制性内切酶EcoRI和EcoRV分别双酶切质粒pT-FVJI与表达载体pcDNA5/FRT/TO,将回收的目的基因片段和载体 片段连接,构建重组表达质粒pcDNA5/FRT/TO—FVII,并与辅助质粒pOG44共转染Flp—In—CHO细胞,经400I...
结果:和转染pcDNA5/FRT空质粒的Flp-In^(TM)CHO细胞相比,转染各CYP2A13野生型和各突变体的CHO细胞中CYP2A13 mRNA和蛋白表达水平增加,对AFB1毒性敏感度增加(P<0.05)。结论:成功建立了稳定表达CYP2A13*1、*2、*5、*6、*8和*9 Flp-In^(TM)CHO细胞系。
目的利用Flp/FRT位点特异性重组技术,在Flp-In-CHO细胞中表达重组人凝血因子Ⅶ(rhFⅦ),并进行鉴定.方法用限制性内切酶EcoRⅠ和EcoRⅤ分别双酶切质粒pT-FⅦ与表达载体pc... 王卓,吕茂民,冯晶晶,... - 《中国生物制品学杂志》 被引量: 9发表: 2010年 位点特异性重组系统及其应用 位点特异性重组系统可在重组酶...
随后利用位点特异性重组系统(FLP-FRT)将外源基因定点整合到Hotspot区域,以实现外源基因在CHO细胞基因组中的定点整合及高效表达。并利用该细胞系实现了k2tPA的高表达,... 周宏,刘志刚,孙志伟,... - 《生物工程学报》 被引量: 17发表: 2007年 Abstract 4964: Nonsense MED12 mutation in a patient with T-cell...