所以，通过Annexin V和PI双染的方法，就可以把早期凋亡的细胞与晚期凋亡加坏死的细胞区分开来。Annexin V-FITC/PI法的实验步骤：1，细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300g离心5min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤细胞一次，轻轻重悬细胞并计数。2，取1-5×10^5重悬的细胞，300g离心5min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离...
1、Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。 2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。 (三) 获得含重组表达质粒的表达菌种 1、 将连接产物转化大肠杆菌DH5...
Annexin V-EGFP的绿色荧光通过FITC通道(FL1)检测;PI红色荧光通过PI通道(FL2或FL3)检测,建议使用FL3。 荧光补偿调节:使用未经凋亡诱导处理的正常细胞,作为对照进行荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。 三、注意事项 1. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide (PI)避光保存及使用。 2. Propidium Iodide (PI)...
1、 Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。3、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG...
Annexin V-FITC/PI双染流式分析细胞凋亡（图1）：图2：用阴性对照(左)或staurosporine(一种凋亡诱导剂)处理Jurkat细胞4小时，清洗，然后用ICT的Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒(货号9124)染色10分钟。在流式细胞仪上读数细胞。阴性对照组仅在2.7%的细胞群中诱导了Annexin V-FITC标记(R2，左)，而staurosporine实验组...
Frdbio ®细胞凋亡检测试剂盒(FITC/PI双染法) 货号:FrdE00018 试剂盒组分 一.产品说明 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力...
1、Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。 2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。 (三) 获得含重组表达质粒的表达菌种 1、 将连接产物转化大肠杆菌DH5...
流式Annexin-FITC /PI 双染法测凋亡,各个象限代表什么状态的细胞 答案 理论上无染色的细胞室健康细胞,annexin单染的是早期凋亡,双染是中期,PI单染是坏死细胞。其实这个检测的结果是很不准确的,已经逐渐被弃用,而换用其他更加特异敏感的方法,比如活化的caspase等等。这个方法人为的...相关推荐 1流式Annexin-FITC ...
Q3：(AnnexinV-FITC)+/PI-，此区域的细胞为早期凋亡细胞。Q4：(AnnexinV-FITC)-/PI-，此区域的细胞为活细胞。资料扩展：细胞(英文名:cell)并没有统一的定义，比较普遍的提法是:细胞是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成，但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。一...
Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒( Annexin V-FITC/ PI Apoptosis Detection Kit)是用FITC融合的重组人 Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷酯酰丝氨酸(PS)的一种细肥凋亡检测试剂盒。可以使用流式细胞仪、荧光微镜或其它荧光检测设备进行检测。图源: