Annexin V-FITC/PI法的原理： 正常细胞(活细胞)具有完好的细胞膜，此时细胞膜的组分之一——磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine，PS)位于细胞膜的内侧，当细胞发生凋亡时，细胞膜的结构发生改变，这使得原本在细胞膜内侧的PS外翻到细胞膜的表面，这种现象在凋亡的早期就会出现，因此就可以用与PS具有高亲和力、标记了荧...
艾美捷Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒提供了一种简单有效的方法将不同凋亡时期的细胞有效区分开。凋亡早期细胞膜完整，表面暴露PS的细胞Annexin V-FITC染色呈阳性(绿色)，PI可以识别晚期凋亡和坏死细胞，这些细胞已失去质膜完整性，因此晚期凋亡和坏死细胞的细胞将被Annexin V-FITC和PI双重标记(绿色和红色...
1、Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。(三) 获得含重组表达质粒的表达菌种 1、 将连接产物转化大肠杆菌DH5α...
15min，随后置于冰上；（5）检测：①流式细胞仪检测，Annexin V-FITC为绿色荧光（激发波长488nm，发射波长525nm），PI为红色荧光（激发波长535nm，发射波长为615nm）；②在荧光显微镜下用双色滤光片观察，Annexin V-FITC荧光信号呈绿色，PI荧光信号呈红色。结果判断：图2 不同处理条件下Annexin V/PI双染流式法...
艾美捷Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒注意事项：1.该试剂盒只能检测活细胞,而不能用于切片、擦刮、固定或浸润细胞样品的检测。2.细胞凋亡是一种持续变化的动态过程,选择合适的诱导时间对观察凋亡比较重要。染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加 3.如果有细菌或真菌污染,会严重...
1、 Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。 2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。
1、 Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。 2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。
Annexin V-FITC荧光信号呈绿色,PI荧光信号呈红色;3使用流式细胞仪正确分析Annexin V-FITC/PI双染的细胞前要求仪器的荧光补偿来去除两种染料激发光之间的叠加。因为荧光补偿设置与PMT的电压直接相关,所以不同仪器之间的补偿不同。建议在实验开始阶段分析经Annexin V、PI分别单染的细胞来调整荧光补偿去除光谱重叠。根据...
图1：Annexin V 检测原理 02 实验结果展示 图2：Annexin V-FITC/PI（E-CK-A211）实验结果展示 03实验中需要注意的细节 a. 样本制备方面：（1）贴壁细胞要尽量使用不含EDTA的胰酶进行消化。如果一定要用含EDTA的胰酶，终止消化后，要将细胞洗涤干净，尽量去除EDTA。（2）比较难消化的细胞、组织等样本，可以分...
Annexin VAnnexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒(膜联蛋白A5-绿色荧光素/碘化丙啶细胞凋亡检测试剂盒)(胎盘抗凝蛋白-绿色荧光素/碘化丙啶细胞凋亡检测试剂盒 凯基Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒 (Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit) Cat number:KGA For Research Use Only Store at4℃for one year...