Annexin V-FITC/PI双染法是一种常用的细胞凋亡检测技术,能够有效区分早期凋亡细胞和坏死细胞。这一方法利用了Annexin V与细胞膜磷脂的结合特性以及碘化丙啶(PI)对细胞膜完整性的指示作用,从而实现对细胞凋亡的精确检测。 在Annexin V-FITC/PI双染法中,Annexin V是一种可以特异性结合暴露在细胞外的磷脂酰丝氨酸(PS
细胞凋亡是细胞程序性死亡的一种形式,对于维持生物体的正常生理功能至关重要。Annexin V-FITC/PI双染法是一种常用的细胞凋亡检测技术,能够有效区分早期凋亡细胞和坏死细胞。这一方法利用了Annexin V与细胞膜磷脂的结合特性以及碘化丙啶(PI)对细胞膜完整性的指示作用,从而实现对细胞凋亡的精确检测。在Annexin V-F...
Annexin V-FITC/PI双染法:解密细胞凋亡检测的核心技术 在生命科学和医学研究中,快速、准确地检测细胞凋亡是理解疾病机制和药物开发的关键。Annexin V-FITC(异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V)与PI(碘化丙啶)双染法,正是目前应用最广泛的凋亡检测技术之一。本文将深入解析其原理、操作...
Annexin V单染组:将细胞置于55℃水浴中处理10分钟,或加入凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,随后加入5μl Annexin V-FITC。PI单染组:取一半细胞加入4%多聚甲醛(使细胞死亡),离心后用PBS洗涤,再与正常活细胞混合,并加入5μl PI。Annexin V和PI双染组:同样进行55℃水浴处理或加入凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,之后分别...
15min,随后置于冰上;(5)检测:①流式细胞仪检测,Annexin V-FITC为绿色荧光(激发波长488nm,发射波长525nm),PI为红色荧光(激发波长535nm,发射波长为615nm);②在荧光显微镜下用双色滤光片观察,Annexin V-FITC荧光信号呈绿色,PI荧光信号呈红色。结果判断:图2 不同处理条件下Annexin V/PI双染流式法...
Annexin V-FITC通常与PI(碘化丙啶)联合使用,实现对细胞死亡状态的精准区分:Annexin V阳性/PI阴性代表早期凋亡,Annexin V阳性/PI阳性表示晚期凋亡或坏死,而Annexin V阴性/PI阴性则为正常活细胞。这种双染法成为当前分析细胞命运和评估药物诱导凋亡效果的金标准之一。应用:Annexin V-FITC具有灵敏度高、操作简便、...
在Annexin V-FITC/PI双染法中,Annexin V是一种可以特异性结合暴露在细胞外的磷脂酰丝氨酸(PS)的蛋白。当细胞发生凋亡时,PS会从细胞内转移到细胞膜外侧,这使得Annexin V能够与之结合。通过使用FITC标记的Annexin V,可以在荧光显微镜下观察到早期凋亡细胞的绿色荧光信号。
所以,通过Annexin V和PI双染的方法,就可以把早期凋亡的细胞与晚期凋亡加坏死的细胞区分开来。Annexin V-FITC/PI法的实验步骤:1,细胞按照实验方案进行凋亡诱导,300g离心5min,弃上清,收集细胞,PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬细胞并计数。2,取1-5×10^5重悬的细胞,300g离心5min,弃上清。用PBS洗涤细胞一次,...
Annexin V-FITC/PI双染流式分析细胞凋亡(图1) : 图2:用阴性对照(左)或staurosporine(一种凋亡诱导剂)处理Jurkat细胞4小时,清洗,然后用ICT的Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒(货号9124)染色10分钟。在流式细胞仪上读数细胞。阴性对照组仅在2.7%的细胞群中诱导了Annexin V-FITC标记(R2,左),而staurosporine实验组在54...
1、 Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。 2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。