所以，通过Annexin V和PI双染的方法，就可以把早期凋亡的细胞与晚期凋亡加坏死的细胞区分开来。Annexin V-FITC/PI法的实验步骤：1，细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300g离心5min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤细胞一次，轻轻重悬细胞并计数。2，取1-5×10^5重悬的细胞，300g离心5min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离...
Annexin V/PI双染流式凋亡是利用FITC标记的Annexin V蛋白和PI脱氧核糖核酸来检测细胞凋亡状态,是目前敏感度检测细胞凋亡率最高的方法之一,广泛应用于流式细胞术中研究细胞凋亡。Annexin V/PI双染流式凋亡原理是基于凋亡被动法面的研究。 Annexin V/PI双染流式凋亡原理的基本思想是,凋亡是一种特殊的细胞过程,变态的...
用荧光素(FITC、Alexa Fluor488等)标记的Annexin-V作为探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生;碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞,PI能够透过细胞膜而将细胞核染红。因此将Annexin-V与PI结合使用,就可以检测出细胞群体中的早期...
Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素(EGFP、FITC)标记,以标记了的Annexin V作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测...
一、Annexin V/PI双染法Annexin V/PI双染法是基于生物学功能检测细胞凋亡的方法，即检测细胞膜完整性，可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测，目前流式是最常用的细胞凋亡检测方法之一。原理：Annexin V可与磷脂酰丝氨酸（PS）特异性结合，因此，可以作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。但Annexin...
一、原理 磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。将Annexin V进行荧光素(FITC、PE)或Biotin标记,以标记了的Annexin V作为荧光...
Annexin V-FITC 通常与细胞膜非渗透性核酸荧光染料联合使用以检测凋亡细胞。常用的染料是 PI。正常细胞和早期凋亡细胞的细胞膜是完整的,核酸染料 Propidium iodide(PI) 不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞,PI 能够透过细胞膜与细胞核结合呈现红色。
AnnexinV/PI双染法是常用的细胞凋亡检测方法,其原理是凋亡早期的细胞细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)会发生外翻,与绿色荧光素标记的 AnnexinV 特异性结合;凋亡晚期的细胞细胞膜开始破裂,红色荧光标记的核酸染料(PI)可以与DNA 结合使之染色。下列叙述正确的是
(AnnexinV-FITC)/PI双染法检测肿瘤细胞坏死及凋亡情况:原理:细胞膜组分磷脂酰丝氨酸(PS)在正常情况下位于细胞膜内侧,当细胞坏死或凋亡时,则迁移至细胞膜外侧。磷脂结合蛋白V(AnnexinV)是一种钙依赖性的磷脂结合蛋白,它与PS具有高度的结合力。荧光素FITC标记的AnnexinV可以作为探针检测暴露在细胞膜外侧的磷脂酰丝氨酸...