所以,通过Annexin V和PI双染的方法,就可以把早期凋亡的细胞与晚期凋亡加坏死的细胞区分开来。Annexin V-FITC/PI法的实验步骤:1,细胞按照实验方案进行凋亡诱导,300g离心5min,弃上清,收集细胞,PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬细胞并计数。2,取1-5×10^5重悬的细胞,300g离心5min,弃上清。用PBS洗涤细胞一次,离...
一、Annexin V/PI双染法Annexin V/PI双染法是基于生物学功能检测细胞凋亡的方法,即检测细胞膜完整性,可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测,目前流式是最常用的细胞凋亡检测方法之一。原理:Annexin V可与磷脂酰丝氨酸(PS)特异性结合,因此,可以作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。但Annexin...
细胞凋亡是细胞程序性死亡的一种形式,对于维持生物体的正常生理功能至关重要。Annexin V-FITC/PI双染法是一种常用的细胞凋亡检测技术,能够有效区分早期凋亡细胞和坏死细胞。这一方法利用了Annexin V与细胞膜磷脂的结合特性以及碘化丙啶(PI)对细胞膜完整性的指示作用,从而实现对细胞凋亡的精确检测。在Annexin V-F...
用荧光素(FITC、Alexa Fluor488等)标记的Annexin-V作为探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生;碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞,PI能够透过细胞膜而将细胞核染红。因此将Annexin-V与PI结合使用,就可以检测出细胞群体中的早期...
Annexin V-FITC 通常与细胞膜非渗透性核酸荧光染料联合使用以检测凋亡细胞。常用的染料是 PI。正常细胞和早期凋亡细胞的细胞膜是完整的,核酸染料 Propidium iodide(PI) 不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞,PI 能够透过细胞膜与细胞核结合呈现红色。
一、原理 磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。将Annexin V进行荧光素(FITC、PE)或Biotin标记,以标记了的Annexin V作为荧光...
Annexin V/PI双染流式凋亡是利用FITC标记的Annexin V蛋白和PI脱氧核糖核酸来检测细胞凋亡状态,是目前敏感度检测细胞凋亡率最高的方法之一,广泛应用于流式细胞术中研究细胞凋亡。Annexin V/PI双染流式凋亡原理是基于凋亡被动法面的研究。 Annexin V/PI双染流式凋亡原理的基本思想是,凋亡是一种特殊的细胞过程,变态的...
人抗凝血剂Annexin V是一种35-36 kDa Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,对PS具有高度亲和力。Annexin V标记有荧光团或生物素,可通过与外叶PS结合识别凋亡细胞。碘化丙啶(PI)是一种荧光核染料,对活细胞和凋亡细胞不敏感,但对死细胞有红色荧光染色,与细胞内的核酸结合紧密。Annexin V-EGFP/PI双染细胞凋亡检测试剂盒...
annexinvpi双染色法原理如下: Annexin V是一种结合磷脂酰丝氨酸(PS)的蛋白质,在细胞凋亡过程中,细胞膜上的PS会外翻到细胞表面,因此Annexin V可以用来检测细胞凋亡的早期阶段。 PI是一种DNA染料,只有在细胞膜破裂后才能进入细胞内结合到DNA上,因此PI可以用来检测细胞凋亡的后期阶段。 在Annexin V-PI双染色法中,...
Annexin V-FITC/PI双染法基本原理 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)位于细胞膜的胞浆侧。细胞发生早期凋亡后,PS外翻到胞膜侧,Annexin V对PS有高度亲和力,用FITC标记Annexin V,PS外翻的细胞由于结合Annexin V-FITC发出绿色荧光。凋亡晚期,细胞膜结构受损,碘化丙啶(PI)透过细胞膜进入细胞,细胞同时发出红色荧光和绿色...