所以，通过Annexin V和PI双染的方法，就可以把早期凋亡的细胞与晚期凋亡加坏死的细胞区分开来。Annexin V-FITC/PI法的实验步骤：1，细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300g离心5min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤细胞一次，轻轻重悬细胞并计数。2，取1-5×10^5重悬的细胞，300g离心5min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离...
流式Annexin-FITC /PI 双染法测凋亡,各个象限代表什么状态的细胞 答案 理论上无染色的细胞室健康细胞,annexin单染的是早期凋亡,双染是中期,PI单染是坏死细胞。其实这个检测的结果是很不准确的,已经逐渐被弃用,而换用其他更加特异敏感的方法,比如活化的caspase等等。这个方法人为的...相关推荐 1流式Annexin-FITC ...
Annexin V-FITC/PI双染流式分析细胞凋亡（图1）：图2：用阴性对照(左)或staurosporine(一种凋亡诱导剂)处理Jurkat细胞4小时，清洗，然后用ICT的Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒(货号9124)染色10分钟。在流式细胞仪上读数细胞。阴性对照组仅在2.7%的细胞群中诱导了Annexin V-FITC标记(R2，左)，而staurosporine实验组...
1、 Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。3、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG...
1、Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。 2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。 (三) 获得含重组表达质粒的表达菌种 ...
Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒( Annexin V-FITC/ PI Apoptosis Detection Kit)是用FITC融合的重组人 Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷酯酰丝氨酸(PS)的一种细肥凋亡检测试剂盒。可以使用流式细胞仪、荧光微镜或其它荧光检测设备进行检测。图源：网络 Annexin V是一种分子量为358kD的...
Annexin V-FITC荧光信号呈绿色,PI荧光信号呈红色;3使用流式细胞仪正确分析Annexin V-FITC/PI双染的细胞前要求仪器的荧光补偿来去除两种染料激发光之间的叠加。因为荧光补偿设置与PMT的电压直接相关,所以不同仪器之间的补偿不同。建议在实验开始阶段分析经Annexin V、PI分别单染的细胞来调整荧光补偿去除光谱重叠。根据...
1、 Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。 2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。
15min，随后置于冰上；（5）检测：①流式细胞仪检测，Annexin V-FITC为绿色荧光（激发波长488nm，发射波长525nm），PI为红色荧光（激发波长535nm，发射波长为615nm）；②在荧光显微镜下用双色滤光片观察，Annexin V-FITC荧光信号呈绿色，PI荧光信号呈红色。结果判断：图2 不同处理条件下Annexin V/PI双染流式法...
Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒( Annexin V-FITC/ PI Apoptosis Detection Kit)是用FITC融合的重组人 Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷酯酰丝氨酸(PS)的一种细肥凋亡检测试剂盒。可以使用流式细胞仪、荧光微镜或其它荧光检测设备进行检测。