活性氧(ROS)检测方法之DCFH-DA荧光探针法 活性氧(Reactive Oxygen Species, ROS)是一类在生命活动中起重要作用的含氧活性分子,包括超氧阴离子(O₂⁻)、过氧化氢(H₂O₂)、羟基自由基(·OH)等。它们在低浓度时作为信号分子参与正常的生理过程,而在高浓度时则会导致氧化应激,引发细胞损伤甚至死亡。因此,准...
将DCFH-DA按1∶1000稀释于无血清培养液中,终浓度为10μmol/L。去除细胞培养液,加入适量稀释好的DCFH-DA,覆盖细胞,通常六孔板每孔不少于1mL。37℃培养箱内孵育20分钟。用无血清培养液洗涤细胞三次,去除未进入细胞内的DCFH-DA。活性氧阳性对照在刺激20～30分钟后显著提高活性氧水平。 收集细胞后装载探针📦 将D...
DCFH-DA检测法的步骤如下：1.细胞准备：将需要检测活性氧的细胞培养在合适的培养基中，保证细胞的活力和完整性。2.DCFH-DA处理：将培养的细胞离心，去除培养基，并用含有适当浓度的DCFH-DA的PBS缓冲液重新悬浮细胞。DCFH-DA可在一定浓度下直接添加到细胞培养基中，也可在细胞中预处理一段时间。3.洗涤：DCFH-DA...
本文将介绍dcfh-da荧光探针实验方法,包括准备实验材料、实验步骤、数据分析等内容。 一、准备实验材料 1. dcfh-da荧光探针:这是一种常用的荧光探针,用于检测活性氧(ROS)的水平。实验前需要保证荧光探针的纯度和稳定性。 2. 细胞培养基:用于培养细胞,保证细胞的健康状况。 3. 细胞样本:需要提前培养好的细胞样本,...
【预期用途】本试剂盒用于精子活性氧类物质(ROS)DCFH-DA染色。【染色原理】 DCFH-DA本身没有荧光,但可以自由穿越精子细胞膜。进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。DCFH不能通透细胞膜被标记到细胞内。在过氧化氢存在的条件下,DCFH被氧化生成荧光物质DCF,经488nm激光激发呈绿色荧光(发射波长500-530nm),同...
目前,用于检测细胞内ROS最广泛采用的方法是DCFH-DA荧光探针法。DCFH-DA(二氯荧光黄双乙酸盐)是一种可指示的探针,其本身不具有荧光,但可以自由穿过细胞膜。一旦进入细胞,它会被细胞内的酯酶水解成DCFH。由于DCFH无法穿过细胞膜,因此荧光探针会在细胞内积聚。细胞内的ROS能够氧化无荧光的DCFH,生成有荧光的DCF,且荧光...
DCFH-DA(2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate)是一种专门用于检测细胞内活性氧(ROS,Reactive Oxygen Species)水平的荧光探针。它的工作原理非常有趣,让我们一起来看看吧!🌈 细胞摄取DCFH-DA 首先,DCFH-DA是一种脂溶性分子,能够轻松穿越细胞膜,进入细胞内部。一旦进入细胞,DCFH-DA会被细胞内的酯酶水解,去掉...
DCFH-DA分子是无色的,能够穿过细胞膜进入细胞内。一旦进入细胞内,DCFH-DA会被内源酯酶迅速水解成无色的2',7'-二氯荧光酮酮基(DCFH),该分子对氧自由基不敏感。当细胞内有活性氧物种存在时,这些活性氧物种(如超氧阴离子、过氧化氢等)会氧化DCFH为高度荧光的2',7'-二氯荧光酮基(DCF)。DCF的荧光强度与活性氧...
ROS活性氧检测-DCFHDA法 BB-47053 活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括超氧⾃由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等，参与细胞⽣长增殖、发育分化、衰⽼和凋亡以及许多⽣理和病理过程。贝博活性氧检测试剂盒是⼀种利⽤荧光探针DCFH-DA进⾏活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本⾝没有荧光...
🌈 探索DCFH-DA的奥秘: DCFH-DA,全名2,7-双氯荧光素蛋白乙酸盐,是一种强大的活性氧(ROS)荧光探针。在细胞内,它被酯酶水解后,会生成2,7-双氯四氟双烷(2,7-双氯荧光素蛋白),随后通过与双氧水的反应产生荧光素。在氧化应激条件下,二氢荧光素双乙酸盐可能会引发一系列氧化反应。这种探针在生物学研究中被广...