本文将介绍dcfh-da荧光探针实验方法,包括准备实验材料、实验步骤、数据分析等内容。 一、准备实验材料 1. dcfh-da荧光探针:这是一种常用的荧光探针,用于检测活性氧(ROS)的水平。实验前需要保证荧光探针的纯度和稳定性。 2. 细胞培养基:用于培养细胞,保证细胞的健康状况。 3. 细胞样本:需要提前培养好的细胞样本,...
DCFH-DA最初作为一种检测脂质过氧化和活性氧产生的荧光探针而被引入。在细胞内,DCFH-DA可以被酯酶水解成DCFH(2',7'-二氯荧光二酚),而DCFH与活性氧反应生成Dichlorofluorescein(DCF)产生强烈的绿色荧光。DCFH-DA检测法被广泛应用于反应氧化应激和自由基生成的过程。 DCFH-DA检测法实际上是一种间接测定活性氧的方法...
原位装载探针:本方法仅适用于贴壁培养细胞。按照1:1000用无血清培养液稀释DCFH-DA,使终浓度为10μM。去除细胞培养液,加入适当体积稀释好的DCFH-DA。加入的体积以能充分盖住细胞为宜,通常对于六孔板的一个孔加入稀释好的DCFH-DA的体积为1毫升。37℃细胞培养箱内孵育20分钟。用无血清细胞培养液洗涤细胞三次,以充分...
DCFH-DA活性氧检测原理: 细胞摄取后,DCFH-DA 被细胞酯酶脱乙酰化为非荧光化合物,随后被 ROS 氧化为 2'-7'二氯荧光素 (DCF)。 DCF是一种荧光化合物,可通过荧光计、流式细胞仪或荧光显微镜检测,其最大激发光谱和发射光谱分别为495 nm和529 nm。 DCFH-DA激发波长: DCFH-DA的最大激发和吸收波长分别为:Ex/Em...
因此,DCFH-DA的荧光信号可以用来反映细胞内氧化应激水平。2',7'-二氯荧光素双醋酸盐荧光探针:2',7'-二氯荧光素双醋酸盐(DCFH-AC)是另一种用于检测氧化应激的荧光探针。它的工作原理类似于DCFH-DA,它被内源酯酶水解成为Dichlorofluorescein(DCF),在受到氧化剂作用时会发出荧光信号。这种探针也常用于细胞内...
目前,用于检测细胞内ROS最广泛采用的方法是DCFH-DA荧光探针法。DCFH-DA(二氯荧光黄双乙酸盐)是一种可指示的探针,其本身不具有荧光,但可以自由穿过细胞膜。一旦进入细胞,它会被细胞内的酯酶水解成DCFH。由于DCFH无法穿过细胞膜,因此荧光探针会在细胞内积聚。细胞内的ROS能够氧化无荧光的DCFH,生成有荧光的DCF,且荧光...
DCFH-DA代表2',7'-二氯二氟荧光素膦酚酯(Dichlorodihydrofluorescein diacetate)。这是一种用于检测细胞内氧化应激的荧光探针。DCFH-DA是一种不荧光的分子,在细胞内酯酶的作用下,它会被水解成为Dichlorodihydrofluorescein(DCFH),这种分子可以被氧化物质氧化成为高度
本试剂盒是一种利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。本试剂...
DCFH-DA(2',7'-二氯二羟基草酚二乙酸酯)是一种常用的荧光探针,用于测量细胞内氧化应激水平。它广泛应用于细胞生物学、生物化学和毒理学研究中,用于检测活性氧自由基(ROS)的生成和浓度的变化。 以下是有关DCFH-DA荧光探针的一些信息: 工作原理: DCFH-DA是一种细胞渗透性的非荧光物质。一旦进入细胞,它会被内源...
DCFH 的双乙酸酯衍生物2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA),该探针较DCFH有好的脂溶性和透膜性,应用于细胞内ROS的检测.过氧化氢荧光探针在生物学、医学和化学等领域有广的应用价值。例如:1. 生物学研究:可以用于研究生物体系中过氧化氢的生成、运输和分布等规律,以及过氧化氢在细胞信号转导、免疫应答和...