本文将介绍dcfh-da荧光探针实验方法,包括准备实验材料、实验步骤、数据分析等内容。 一、准备实验材料 1. dcfh-da荧光探针:这是一种常用的荧光探针,用于检测活性氧(ROS)的水平。实验前需要保证荧光探针的纯度和稳定性。 2. 细胞培养基:用于培养细胞,保证细胞的健康状况。 3. 细胞样本:需要提前培养好的细胞样本,...
【预期用途】本试剂盒用于精子活性氧类物质(ROS)DCFH-DA染色。【染色原理】 DCFH-DA本身没有荧光,但可以自由穿越精子细胞膜。进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。DCFH不能通透细胞膜被标记到细胞内。在过氧化氢存在的条件下,DCFH被氧化生成荧光物质DCF,经488nm激光激发呈绿色荧光(发射波长500-530nm),同...
DCFH-DA检测法实际上是一种间接测定活性氧的方法。原理基于DCFH-DA能够通过酯酶水解成DCFH,而DCFH可以直接或通过活性氧来氧化生成DCF。因此,DCF的荧光强度与细胞内的活性氧水平成正相关。DCFH-DA检测法常用于检测细胞或组织中的过氧化氢(H2O2)、羟自由基(•OH)、超氧阴离子(O2•-)等活性氧物种。 DCFH-DA检测...
DCF的荧光强度与活性氧物种的浓度成正比,因此可以通过测量DCF的荧光强度来间接测量活性氧物种的生成。 操作步骤: 1.将DCFH-DA溶解在适当的有机溶剂(如二甲基亚砜、乙酸乙酯等)中制备为一定浓度的工作溶液。 2.将细胞或组织样品均匀洒在培养皿或载玻片上。 3.向细胞或组织样品中加入适量的DCFH-DA工作溶液,使其...
DCFH-DA 化学名:2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA,2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(也称为:2',7'-二氯荧光素二乙酸酯)可以被细胞酯酶水解为 2',7'-二氯二氢荧光素(也称为 2',7'-二氯荧光素)和 然后主要被 H2O2 氧化成 2',7'-二氯荧光素。 2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯可能...
DCFHDA荧光探针是一种荧光染料,其原理是利用荧光分子的发射特性,来检测分子的存在和活性。DCFHDA荧光探针的原理比较简单,它是一种非极性分子,在细胞内可以被酯酶水解成为极性分子DCFH,这种分子可以通过细胞膜自由进出,但是在细胞内不会自发氧化。当细胞内有活性氧物质存在时,DCFH会被氧化成为荧光染料DCF,这种荧光染料具...
DCFH能够被ROS氧化成为强荧光产物DCF,因此可以用来检测ROS的产生情况。 二、DCFH-DA荧光探针原理 1. DCFH-DA的特点 DCFH-DA具有以下特点: (1)易于渗透细胞膜:由于其结构中含有酯基,可以很容易地穿过细胞膜进入到细胞内部。 (2)不具有荧光:DCFH-DA在细胞内并不会自发发出荧光信号,而需要被ROS氧化后才会发出强烈...
DCFH-DA是一种常用的荧光探针分子,通常应用于生物学研究领域。它是一种非极性脂溶性分子,由于其能够在活细胞内被内切酯酶水解成为高度荧光的荧光染料,因此DCFH-DA广泛用于检测活细胞中的ROS(活性氧种)水平。在细胞内被酶水解后,DCFH-DA会转化成为DCFA(2',7'-二叔丁基二氧苯基-五氧杂环庚辛-6-非酮-4'-氧硼...
DCFH 的双乙酸酯衍生物2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)，该探针较DCFH有好的脂溶性和透膜性，应用于细胞内ROS的检测．过氧化氢荧光探针在生物学、医学和化学等领域有广的应用价值。例如：1. 生物学研究：可以用于研究生物体系中过氧化氢的生成、运输和分布等规律，以及过氧化氢在细胞信号转导、免疫应答和...
活性氧(ROS)化学荧光法试剂盒说明书 一、测定原理: 本试剂盒采用的DCFH-DA(2,7-Dichlorofuorescin Diacetate)探针,是迄今常用、灵敏的细胞内活性氧检测探针。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,当其进入细胞内后,会被细胞内的相关酯酶水解为DCFH(Dichlorofluorescin)。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易...