H2DCFDA(DCFH-DA)是一种通用的氧化应激指示剂。具细胞膜渗透性,本身无荧光。一旦进入细胞后,被细胞酯酶水解生成2',7'-二氯二氢荧光素(DCFH),之后被快速氧化生成强荧光产物2',7'-二氯荧光素(DCF),可用荧光光谱检测。适用于检测活性氧(ROS)和一氧化氮(·NO),以及确定总的氧化应激水平。普遍用来监测细胞氧化...
DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。因此需要避光,但不需要使用透膜剂。 ②为何有时染色后背景颜色过深...
DCFH-DA 的使用步骤:DCFH-DA 使用仅提供指导和参考,具体实验方案应针对您的特定应用进行修改:1. BCECF开封前,适当的做离心,以保证粉末落入样品管低,确保染料足量;2. 加入适量无水DMSO(DMSO检验用有机滤器进行过滤使用) 或者其他有机溶剂配制成 1~10mM储存液进行使用,剩余的制备液分装存储,...
DCFH-DA 化学名:2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA,2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(也称为:2',7'-二氯荧光素二乙酸酯)可以被细胞酯酶水解为 2',7'-二氯二氢荧光素(也称为 2',7'-二氯荧光素)和 然后主要被 H2O2 氧化成 2',7'-二氯荧光素。 2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯可能...
目前,用于检测细胞内ROS最广泛采用的方法是DCFH-DA荧光探针法。DCFH-DA(二氯荧光黄双乙酸盐)是一种可指示的探针,其本身不具有荧光,但可以自由穿过细胞膜。一旦进入细胞,它会被细胞内的酯酶水解成DCFH。由于DCFH无法穿过细胞膜,因此荧光探针会在细胞内积聚。细胞内的ROS能够氧化无荧光的DCFH,生成有荧光的DCF,且荧光...
DCFH-DA激酶测定 ROS测量 为了检测细胞内ROS水平,使用ROS敏感性探针H2DCFDA。 将贴壁细胞(ESC,difESC,eMSC,HeLa,U118)与PBS中的5μM染色溶液在37℃下在黑暗中孵育30分钟,然后用0.05%胰蛋白酶-EDTA溶液收获,悬浮在新鲜培养基中,并且 用流式细胞仪立即分析。 将对照和PHA活化的淋巴细胞重悬浮于PBS中,与5μMH2...
1. DCFH-DA需要在适当的条件下保存,以避免其失效或降解。 2. 在进行荧光观察时,需要尽量缩短观察时间,并在操作和存放过程中注意避光保存,以避免荧光淬灭。 3. 如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且无法通过调整相关设置和参数来改善,可以考虑使用PBS将Annexin...
修改日期:2024.09.14 活性氧检测试剂盒(DCFH-DA 荧光法) 产品简介: 活性氧(Reactive Oxygen Species, ROS)包括超氧化物,过氧化氢,羟自由基以及具有 高氧化活性的活性氧代谢产物.活性氧主要由中性粒细胞,巨噬细胞,单核细胞为代表的免 疫细胞受到刺激后产生,其它体细胞在应激条件下线粒体电子传递异常也会产生活性...
4.吉姆萨染色法,吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同; 5.细胞免疫荧光染色法,免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合。 蛋白提取/定量 蛋白提取频道,提供蛋白提取实验用蛋白提取试剂盒,蛋白裂解液,蛋白浓度测定试剂盒等蛋白质实验用试剂及耗材。其中蛋白提取系列包括:植物蛋白提取试剂盒,细胞组织蛋...