本试剂盒采用DCFH-DA(2,7-dichlorofluorescindiacetate)探针方法，是常用的细胞内活性氧检测探针。原理是：DCFH-DA没有荧光，进入细胞后可以被酯酶水解为不能透过细胞膜的DCFH，当活性氧存在时，DCFH被氧化为强绿色荧光物质DCF，荧光在激发波长502nm，发射波长530nm附近有最大波峰，荧光水平与细胞内活性氧水平成正比。...
1. dcfh-da荧光探针：这是一种常用的荧光探针，用于检测活性氧（ROS）的水平。实验前需要保证荧光探针的纯度和稳定性。2. 细胞培养基：用于培养细胞，保证细胞的健康状况。3. 细胞样本：需要提前培养好的细胞样本，确保细胞的密度和活性满足实验要求。4. 无菌离心管、移液枪等实验用具：用于实验操作时的样本处理等...
荧光探针法:使用特定的荧光探针,探针与活性氧反应后,荧光强度会发生变化,通过测量荧光强度的变化来定量活性氧的浓度。 化学发光法:活性氧与特定的化学物质反应,产生发光现象,通过检测发光强度来确定活性氧的含量。 比色法:活性氧与显色剂反应,生成有色物质,通过测量吸光度的变化来定量活性氧的浓度。 这些方法各有优...
活性氧检测试剂盒(Reactive oxygen species assay kit)是一种利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF...
DCFH-DA（2',7'-二氯荧光二乙酸）是一种常用于检测细胞内活性氧的荧光探针。DCFH-DA最初作为一种检测脂质过氧化和活性氧产生的荧光探针而被引入。在细胞内，DCFH-DA可以被酯酶水解成DCFH（2',7'-二氯荧光二酚），而DCFH与活性氧反应生成Dichlorofluorescein（DCF）产生强烈的绿色荧光。DCFH-DA检测法被广泛应用于...
1. 探针装载🧪 对于短时间刺激(通常2小时内)的细胞,先装载探针,再用活性氧阳性对照或感兴趣的药物刺激细胞。对于长时间刺激(通常6小时以上)的细胞,先用活性氧阳性对照或感兴趣的药物刺激细胞,再装载探针。 原位装载探针🔬 适用于贴壁培养细胞。将DCFH-DA按1∶1000稀释于无血清培养液中,终浓度为10μmol/L。
二、DCFH-DA荧光探针原理 1. DCFH-DA的特点 DCFH-DA具有以下特点: (1)易于渗透细胞膜:由于其结构中含有酯基,可以很容易地穿过细胞膜进入到细胞内部。 (2)不具有荧光:DCFH-DA在细胞内并不会自发发出荧光信号,而需要被ROS氧化后才会发出强烈的荧光信号。 (3)对活性氧敏感:DCFH-DA只有在存在ROS时才能够被氧化,...
目前,用于检测细胞内ROS最广泛采用的方法是DCFH-DA荧光探针法。DCFH-DA(二氯荧光黄双乙酸盐)是一种可指示的探针,其本身不具有荧光,但可以自由穿过细胞膜。一旦进入细胞,它会被细胞内的酯酶水解成DCFH。由于DCFH无法穿过细胞膜,因此荧光探针会在细胞内积聚。细胞内的ROS能够氧化无荧光的DCFH,生成有荧光的DCF,且荧光...
本试剂盒是一种利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。本试剂...
DCFH-DA 使用步骤的改进：1. 在使用 DCFH-DA 之前，请确保粉末完全落入样品管底部。为此，可适当离心 DCFH-DA 粉末。2. 将 DCFH-DA 溶解于适量的无水 DMSO 中，并通过有机滤器过滤以去除杂质。配制成 1～10 mM 的储存液，分装并存放在冰箱中，避免反复冻融，以保持试剂的活性。3. 实验开始前...