Cre-loxP 主要用于基因敲除,但它也会根据 loxP 位点的取向和位置诱导两个 loxP 位点之间的 DNA 反转和易位[1]。 02 常用的 Cre-loxP 诱变系统 图2. Cre-loxP 诱变系统的原理[1]。 ▐ Cre-ER (Tam) 系统 Cre-ER(Tam)系统,也称为他莫昔芬 (Tamoxifen)诱导的 Cre 系统,是 Cre-LoxP 系统中最为常用...
Cre/LoxP系统存在几种诱导重组的方式，这是基于Cre重组酶与loxP位点的相互作用而实现的。当基因组内存在loxP位点时，一旦有Cre重组酶，便会结合到loxP位点两端的反向重复序列区形成二聚体。此二聚体与其他loxP位点的二聚体结合，进而形成四聚体。随后，loxP位点之间的DNA被Cre重组酶切下，切口在DNA连接酶的作用下重...
Loxp 位点是一段特定的 DNA 序列。当存在 Cre 酶时,它会结合到 loxp 位点上。Cre-loxp 系统可实现基因的敲除。也能用于基因的插入操作。该原理在细胞和生物体的基因编辑中广泛应用。可以精准地控制基因的表达和功能。Cre-loxp 能够介导染色体的重组。 从而导致基因组结构的改变。其作用具有高度的特异性。只会对...
其原理是重组酶Cre能识别loxP位点(特定的DNA序列),并使loxP位点间的基因序列被重组或删除。受此启发,科学家在检测抗虫基因成功导入烟草细胞后,尝试用Cre/loxP重组酶系统删除转基因烟草细胞内的抗除草剂基因,其技术过程如下图所示(其中■表示启动子)。 (1)在基因工程中使用的载体除质粒外,还有 等;loxP是一种含34...
图1 Cre-LoxP基本作用原理 一、Cre-LoxP系统基本作用方式 一般而言，当细胞基因组内存在两个LoxP位点时，Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。重组的结果取决于两个LoxP位点的方向，主要有以下几种可能： 1、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上，但方向相反，Cre重组酶能导致两个LoxP位点间的序列翻转；2、...
Cre/loxp系统的应用 通过病毒引入Cre或loxP元件,结合一种转基因小鼠可达到对某类细胞进行特异性标记或基因操作的目的。 LSL策略应用 mT/mG(ROSA-pCA-loxp-mT-pA-loxp-mG-pA)鼠是一种双荧光报告鼠,这种鼠在正常情况下表达定位在膜上的红色荧光蛋白(TdTomato),而当细胞表达Cre后,则表达定位在膜上的绿色荧光蛋白...
一、Cre-loxP位点特异性重组系统应用基本原理 所谓Cre-loxP位点特异性重组系统,源于噬菌体P1中,存在Cre重组酶(343个氨基酸蛋白,4个亚单位组成)及其能特异识别的一对34 bp的DNA序列(即loxP位点),并根据两个loxP位点的方向性,将两loxP位点之间的DNA序列(也称floxed区域)进行特异性重组切割或反转。 如果在相应细胞/...