Cre-loxP 主要用于基因敲除,但它也会根据 loxP 位点的取向和位置诱导两个 loxP 位点之间的 DNA 反转和易位[1]。2常用的 Cre-loxP 诱变系统 图 2. Cre-loxP 诱变系统的原理[1]。 ▐ Cre-ER (Tam) 系统Cre-ER (Tam) 系统,也称为他莫昔芬 (Tamoxifen) 诱导的 Cre 系统,是 Cre-LoxP 系统中最为...
Cre/LoxP系统存在几种诱导重组的方式,这是基于Cre重组酶与loxP位点的相互作用而实现的。当基因组内存在loxP位点时,一旦有Cre重组酶,便会结合到loxP位点两端的反向重复序列区形成二聚体。此二聚体与其他loxP位点的二聚体结合,进而形成四聚体。随后,loxP位点之间的DNA被Cre重组酶切下,切口在DNA连接酶的作用下重...
Cre-loxp 系统可实现基因的敲除。也能用于基因的插入操作。该原理在细胞和生物体的基因编辑中广泛应用。可以精准地控制基因的表达和功能。Cre-loxp 能够介导染色体的重组。 从而导致基因组结构的改变。其作用具有高度的特异性。只会对含有 loxp 位点的区域产生影响。这一原理为研究基因功能提供了有力工具。帮助科学家...
图1 Cre-loxP诱导基因重组的方式Cre-LoxP系统可以实现对基因的操控,根据Cre重组系统诱导基因重组的方式,我们可以通过如下三种策略实现Cre依赖的基因表达:1、LSL序列(条件性基因选择)将LoxP2和转录终止信号盒(Transcription STOP cassette)插入启动子和目的基因之间,转录终止信号盒两端各有一个同向的LoxP位点,组成...
Cre/loxP重组酶系统是对转基因受体细胞DNA上的特定序列进行定点切割和重新连接,从而在基因或染色体水平上对生物基因进行遗传改造的一种技术。其原理是重组酶Cre能识别loxP位点(特定的DNA序列),并使loxP位点间的基因序列被重组或删除。受此启发,科学家在检测抗虫基因成功导入烟草细胞后,尝试用Cre/loxP重组酶系统删除转基...
Cre-loxP系统分类 1. LSL序列(Cre-on) 基于以上原理上,设计出了LSL序列(loxP-STOP-loxP),在没有Cre酶的情况下,由于STOP cassette的存在,下游基因无法正常表达;在引入Cre酶后,STOP序列被删除后,下游基因可以正常表达,从而实现基因Cre依赖的表达。...
Cre-loxP系统基因重组原理 一般而言,当细胞基因组内存在两个LoxP位点时,Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。Cre重组酶介导两个LoxP位点间的重组是一个动态、可逆的过程,重组的结果取决于两个loxP位点的方向,主要有以下情况:01删除(Deletion)如果两个LoxP位点位于一条DNA链上,且方向相同,Cre重组酶...
一、Cre-loxp重组酶系统的原理 1. Cre重组酶 Cre重组酶是一种来源于大肠杆菌的酶,它能够识别和结合特定的DNA序列loxp,并在该序列上引发DNA的重组事件。Cre酶最初是在嗜盐古细菌(Archaeoglobus fulgidus)中发现的,后来被用于基因编辑和遗传工程领域。 2. loxp序列 loxp序列是Cre-loxp重组酶系统中的关键部分,它是一...