Cre-loxP 主要用于基因敲除,但它也会根据 loxP 位点的取向和位置诱导两个 loxP 位点之间的 DNA 反转和易位[1]。2常用的 Cre-loxP 诱变系统 图 2. Cre-loxP 诱变系统的原理[1]。 ▐ Cre-ER (Tam) 系统Cre-ER (Tam) 系统,也称为他莫昔芬 (Tamoxifen) 诱导的 Cre 系统,是 Cre-LoxP 系统中最为...
Cre-LoxP系统是一种基因编辑技术,其工作原理主要基于Cre重组酶和LoxP位点的相互作用。 Cre重组酶是一种由343个氨基酸组成的单体蛋白,由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码。它具有催化活性,并能特异性识别LoxP位点。LoxP位点是由两个13bp的反向重复序列和一个8bp的间隔区域组成的34bp序列,其中反向重复序列是Cre重组酶的...
LoxP是Locus of X-overP1的缩写,是位于P1噬菌体中长度为34bp的一段序列,由两个13bp的反向回文序列和8bp的中间间隔序列共同组成,反向回文序列是Cre重组酶的识别和结合区域,间隔序列决定LoxP序列的方向。 Cre/loxP诱导基因重组的方式 一般而言,当细胞基因组内存在两个LoxP位点时,Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序...
其原理是重组酶Cre能识别loxP位点(特定的DNA序列),并使loxP位点间的基因序列被重组或删除。受此启发,科学家在检测抗虫基因成功导入烟草细胞后,尝试用Cre/loxP重组酶系统删除转基因烟草细胞内的抗除草剂基因,其技术过程如下图所示(其中■表示启动子)。 (1)在基因工程中使用的载体除质粒外,还有 等;loxP是一种含34...
cre loxp 原理 Cre 重组酶能够识别 loxp 位点并发挥作用。Loxp 位点是一段特定的 DNA 序列。当存在 Cre 酶时,它会结合到 loxp 位点上。Cre-loxp 系统可实现基因的敲除。也能用于基因的插入操作。该原理在细胞和生物体的基因编辑中广泛应用。可以精准地控制基因的表达和功能。Cre-loxp 能够介导染色体的重组。
一、Cre-LoxP系统基本作用方式 一般而言,当细胞基因组内存在两个LoxP位点时,Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。重组的结果取决于两个LoxP位点的方向,主要有以下几种可能: 1、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上,但方向相反,Cre重组酶能导致两个LoxP位点间的序列翻转;2、如果两个LoxP位点位于一条...
Cre-loxP系统分类 1. LSL序列(Cre-on) 基于以上原理上,设计出了LSL序列(loxP-STOP-loxP),在没有Cre酶的情况下,由于STOP cassette的存在,下游基因无法正常表达;在引入Cre酶后,STOP序列被删除后,下游基因可以正常表达,从而实现基因Cre依赖的表达。...
Cre-loxP系统基因重组原理 一般而言,当细胞基因组内存在两个LoxP位点时,Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。Cre重组酶介导两个LoxP位点间的重组是一个动态、可逆的过程,重组的结果取决于两个loxP位点的方向,主要有以下情况:01删除(Deletion)如果两个LoxP位点位于一条DNA链上,且方向相同,Cre重组酶...