Cre重组酶能有效地删除两个LoxP位点间的序列（Deletion）（图1A）；② 如果两个LoxP位点位于一条DNA链上但方向相反，Cre重组酶能诱导两个LoxP位点间的序列翻转（Inversion）（图1B）；③如果两个LoxP位点分别位于两条不同的DNA链或染色体上，Cre重组酶能诱导两条DNA链发生交换或染色体易位，即基因...
1、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上，但方向相反，Cre重组酶能导致两个LoxP位点间的序列翻转；2、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上，并且方向相同，Cre重组酶能有效切除两个LoxP位点间的序列；3、如果两个LoxP位点分别位于两条不同的DNA链或染色体上，Cre酶能介导两条DNA链的交换或染色体易位。图1.Cre-loxP诱导...
1、Cre-LSL策略 该策略是将转录终止信号盒（STOP）置于启动子与目的基因之间，转录终止信号盒两端各有一个同向的LoxP位点，组成promoter-LoxP-STOP-LoxP-gene模式，即LSL序列。在无Cre存在的细胞中，转录终止信号盒下游靶基因完全不表达，但在Cre存在的条件下，基因重组中的Deletion过程发生，移除转录终止信号盒，进而...
首先，需要创建Cre小鼠，其中的Cre重组酶由特定的启动子驱动，从而确保在特定的细胞、组织或全身范围内表达。启动子或增强子的选择将决定Cre重组酶的活性范围和强度。其次，构建Flox小鼠，其靶基因序列两侧带有loxP位点。这样，当Cre重组酶识别到loxP位点时，便能对其进行切割和重组。将这两种小鼠进行杂交，我们可以得到同...
Cre-loxP系统的应用 利用Cre-loxP系统在小鼠体内实现对基因的时空特异性打靶(表达或敲除),原则上需要建立两种小鼠。 首先,建立Cre小鼠。该小鼠中的Cre重组酶由特定启动子驱动,可在特定细胞或组织或全身表达Cre重组酶。Cre重组酶的特异性由驱动Cre的启动子(Promoter)或增强子(Enhance...
二、应用Cre-loxP位点特异性重组系统,实现小鼠条件性靶基因功能研究 三、不同Cre小鼠模型构建策略及方法特点 四、为什么要构建诱导性调控CreERT小鼠模型及其基本特征 五、Cre转基因小鼠模型中Cre插入位点鉴定的挑战与重要性 六、Cre-loxP位点重组系统应用中常见风险及影响因素 ...
应用Cre/LoxP重组系统较为常见的形式是两种转基因动物的杂交。一般的策略为:(1) 利用原核注射的方法获得转基因“Cre小鼠”。一般利用特定启动子控制此小鼠的Cre重组酶的表达;(2) 通过置换型载体的同源重组,在胚胎干细胞中向靶位点引入选择标记基因,并在其两侧引入两个loxP位点,要求两条同源染色体都带有loxP位点,且...
Cre-LoxP重组酶系统在基因工程中扮演着关键角色，其操作分为两个步骤。首先，LoxP序列的引入至关重要，这是通过设计特制的打靶载体，通过同源重组的方式在胚胎干细胞的基因组中实现的。这个过程需要精确筛选出成功的重组子。接下来，Cre酶的介入是基因修饰的核心环节。在细胞水平上，可以使用Cre重组酶的表达...
在FLEX-ON系统中,目的基因反方向位于启动子下方,两侧分别连接两个“头对头”的loxP。Cre重组酶不存在时,目的基因不能表达;当Cre重组酶存在时,可以诱导目的基因的“翻转”,从而表达。 图1. 维真提供依赖Cre的FLEX-ON系统示意图(左); 维真FLEX-ON实验图(右) ...
为了进一步解答大家的实验困扰,工具鼠系列课程限时返场!10月16日(周三)晚7点,由赛业生物动物模型研发负责人牟星、赛业生物产品经理刘凡瑞共同带来「Cre-loxP原理及工具鼠应用要点」主题课程,围绕粉丝朋友们提出的问题展开,穿插模型构建、繁育与鉴定等知识要点,帮你实现从入门到精通。