其原理是重组酶Cre能识别loxP位点(特定的DNA序列),并使loxP位点间的基因序列被重组或删除。受此启发,科学家在检测抗虫基因成功导入烟草细胞后,尝试用Cre/loxP重组酶系统删除转基因烟草细胞内的抗除草剂基因,其技术过程如下图所示(其中■表示启动子)。 (1)在基因工程中使用的载体除质粒外,还有 等;loxP是一种含34...
C、Translocation(易位):两个loxP位点位于不同的DNA链或染色体上,Cre重组酶诱导两条DNA链发生交换或染色体易位。 Cre-loxP系统分类 1. LSL序列(Cre-on) 基于以上原理上,设计出了LSL序列(loxP-STOP-loxP),在没有Cre酶的情况下,由于STOP cassette...
Cre/loxP诱导基因重组的方式一般而言，当细胞基因组内存在两个LoxP位点时，Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。重组的结果取决于两个loxP位点的方向，主要有以下几种可能：① 如果两个LoxP位点位于一条DNA链上且方向相同，Cre重组酶能有效地删除两个LoxP位点间的序列（Deletion）（图1A）；② 如果两个Lox...
一、Cre-loxp重组酶系统的原理 1. Cre重组酶 Cre重组酶是一种来源于大肠杆菌的酶,它能够识别和结合特定的DNA序列loxp,并在该序列上引发DNA的重组事件。Cre酶最初是在嗜盐古细菌(Archaeoglobus fulgidus)中发现的,后来被用于基因编辑和遗传工程领域。 2. loxp序列 loxp序列是Cre-loxp重组酶系统中的关键部分,它是一...
Cre-LoxP 系统是一种基于位点特异性重组的基因编辑技术，由 Cre 重组酶和 LoxP 位点两部分组成。图 1. Cre-loxP system[1]。Cre 重组酶(Cyclization Recombination Enzyme) 由噬菌体 P1 的环化重组酶基因产生的一个 38 kDa 的 DNA 重组酶，可以识别 loxP (locus of x-over, P1) 位点的特定 DNA 片段序列...
Cre-loxP系统基因重组原理 一般而言，当细胞基因组内存在两个LoxP位点时，Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。Cre重组酶介导两个LoxP位点间的重组是一个动态、可逆的过程，重组的结果取决于两个loxP位点的方向，主要有以下情况：01删除（Deletion）如果两个LoxP位点位于一条DNA链上，且方向相同，Cre重组酶...
Cre/LoxP重组酶系统包含两个部分：Cre重组酶及其特异识别的LoxP位点。Cre重组酶（Cyclization Recombination Enzyme）由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码，是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性，而且与限制酶相似，能够特异性识别loxP位点。LoxP（locus of X-overP1）位点长为34bp，包括两个13bp的反向...
Cre-loxP系统的工作原理 识别:Cre重组酶特异性识别loxP位点。 结合:Cre重组酶结合在loxP位点的反向重复序列上。 重组:loxP位点之间的DNA被Cre重组酶切下,切口在DNA连接酶的作用下重新连接。 结果:根据loxP位点的位置和方向,可以发生切除、倒位或易位等不同的重组事件。