Cre/loxP诱导基因重组的方式一般而言,当细胞基因组内存在两个LoxP位点时,Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。重组的结果取决于两个loxP位点的方向,主要有以下几种可能:① 如果两个LoxP位点位于一条DNA链上且方向相同,Cre重组酶能有效地删除两个LoxP位点间的序列(Deletion)(图1A);② 如果两个Lox...
Cre-loxP 主要用于基因敲除,但它也会根据 loxP 位点的取向和位置诱导两个 loxP 位点之间的 DNA 反转和易位[1]。2常用的 Cre-loxP 诱变系统 图 2. Cre-loxP 诱变系统的原理[1]。 ▐ Cre-ER (Tam) 系统Cre-ER (Tam) 系统,也称为他莫昔芬 (Tamoxifen) 诱导的 Cre 系统,是 Cre-LoxP 系统中最为...
Loxp 位点是一段特定的 DNA 序列。当存在 Cre 酶时,它会结合到 loxp 位点上。Cre-loxp 系统可实现基因的敲除。也能用于基因的插入操作。该原理在细胞和生物体的基因编辑中广泛应用。可以精准地控制基因的表达和功能。Cre-loxp 能够介导染色体的重组。 从而导致基因组结构的改变。其作用具有高度的特异性。只会对...
利用Cre-LoxP系统不仅可对基因进行敲除,还可对基因进行特定激活,了解基因的正向效应。在两个同向LoxP位...
C、Translocation(易位):两个loxP位点位于不同的DNA链或染色体上,Cre重组酶诱导两条DNA链发生交换或染色体易位。 Cre-loxP系统分类 1. LSL序列(Cre-on) 基于以上原理上,设计出了LSL序列(loxP-STOP-loxP),在没有Cre酶的情况下,由于STOP cassette...
Cre-loxP的基本原理 Cre-loxP重组是一种特定位点的重组酶技术,可以在DNA的特定位点上执行删除、插入、易位以及倒位。该系统可以针对特定的细胞类型或者采用特定的外部刺激,对细胞中DNA进行改造,在真核和原核系统中都适用。 Cre(Cyclization Recombination Enzyme):是一种重组酶,最早来源于P1噬菌体,属于λInt 酶超基因...
Cre/loxP重组酶系统是对转基因受体细胞DNA上的特定序列进行定点切割和重新连接,从而在基因或染色体水平上对生物基因进行遗传改造的一种技术。其原理是重组酶Cre能识别loxP位点(特定的DNA序列),并使loxP位点间的基因序列被重组或删除。受此启发,科学家在检测抗虫基因成功导入烟草细胞后,尝试用Cre/loxP重组酶系统删除转基...
两个Cre重组酶分子首先识别并分别结合loxP序列的两个反向重复序列,形成一个二聚体(Guo, F., 1997)[10]。 B.四聚体形成 两个前一步骤形成的二聚体互相靠近,最终形成由四个Cre分子与两个loxP位点结合形成的四聚体复合物。 C.DNA切割与交换 Cre重组酶在每个loxP位点的间隔序列中引导单链切割,产生带有3’端羟...
Cre-loxP系统基因重组原理 一般而言,当细胞基因组内存在两个LoxP位点时,Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。Cre重组酶介导两个LoxP位点间的重组是一个动态、可逆的过程,重组的结果取决于两个loxP位点的方向,主要有以下情况:01删除(Deletion)如果两个LoxP位点位于一条DNA链上,且方向相同,Cre重组酶...