Cre/loxP诱导基因重组的方式一般而言，当细胞基因组内存在两个LoxP位点时，Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。重组的结果取决于两个loxP位点的方向，主要有以下几种可能：① 如果两个LoxP位点位于一条DNA链上且方向相同，Cre重组酶能有效地删除两个LoxP位点间的序列（Deletion）（图1A）；② 如果两个Lox...
Cre-loxP 主要用于基因敲除，但它也会根据 loxP 位点的取向和位置诱导两个 loxP 位点之间的 DNA 反转和易位[1]。2常用的 Cre-loxP 诱变系统 图 2. Cre-loxP 诱变系统的原理[1]。 ▐ Cre-ER (Tam) 系统Cre-ER (Tam) 系统，也称为他莫昔芬 (Tamoxifen) 诱导的 Cre 系统，是 Cre-LoxP 系统中最为...
利用Cre-LoxP系统不仅可对基因进行敲除，还可对基因进行特定激活，了解基因的正向效应。在两个同向LoxP位...
基于以上原理上,设计出了LSL序列(loxP-STOP-loxP),在没有Cre酶的情况下,由于STOP cassette的存在,下游基因无法正常表达;在引入Cre酶后,STOP序列被删除后,下游基因可以正常表达,从而实现基因Cre依赖的表达。 2.FLEX/DIO序列(Cre-on) 但是,在实际...
其原理是重组酶Cre能识别loxP位点(特定的DNA序列),并使loxP位点间的基因序列被重组或删除。受此启发,科学家在检测抗虫基因成功导入烟草细胞后,尝试用Cre/loxP重组酶系统删除转基因烟草细胞内的抗除草剂基因,其技术过程如下图所示(其中■表示启动子)。 (1)在基因工程中使用的载体除质粒外,还有 等;loxP是一种含34...
Cre-loxP的基本原理 Cre-loxP重组是一种特定位点的重组酶技术,可以在DNA的特定位点上执行删除、插入、易位以及倒位。该系统可以针对特定的细胞类型或者采用特定的外部刺激,对细胞中DNA进行改造,在真核和原核系统中都适用。 Cre(Cyclization Recombination Enzyme):是一种重组酶,最早来源于P1噬菌体,属于λInt 酶超基因...
两个Cre重组酶分子首先识别并分别结合loxP序列的两个反向重复序列,形成一个二聚体(Guo, F., 1997)[10]。 B.四聚体形成 两个前一步骤形成的二聚体互相靠近,最终形成由四个Cre分子与两个loxP位点结合形成的四聚体复合物。 C.DNA切割与交换 Cre重组酶在每个loxP位点的间隔序列中引导单链切割,产生带有3’端羟...
Cre-loxP系统基因重组原理 一般而言，当细胞基因组内存在两个LoxP位点时，Cre重组酶会诱导两个LoxP位点间的序列发生重组。Cre重组酶介导两个LoxP位点间的重组是一个动态、可逆的过程，重组的结果取决于两个loxP位点的方向，主要有以下情况：01删除（Deletion）如果两个LoxP位点位于一条DNA链上，且方向相同，Cre重组酶...
Cre-loxp系统的原理如下: 1. Cre重组酶的表达:首先,使用基因工程技术将Cre酶的编码基因嵌入到转基因小鼠的基因组中,使其能够在特定的组织或细胞类型中产生。通过引入特定的启动子或组织特异性表达的促进子,可以实现Cre重组酶在目标组织或细胞中的表达。 2.基因敲除载体:在目标基因的启动子或内含子区域,插入一对lox...