作者构建了名为VivoVec的平台,由第三代自失活的慢病毒颗粒(VVP)组成,这些颗粒表面表达了一种抗CD3单链可变片段(scFv);为了于确保T细胞的正常激活、促进分化、获得效应功能和形成长期记忆,作者在慢病毒颗粒表面插入CD80和CD58共刺激因子,并进行测试:实验组为载有共刺激因子(Costin)的VVP,对照组为不含有CD80和CD58...
01 慢病毒载体和CAR-T 慢病毒载体是一种源于人类免疫缺陷病毒（HIV）的基因载体。在构建慢病毒载体时，为了避免产生有复制能力的病毒，会把HIV-1基因组分装与不同的质粒中，再共转染细胞，获得只有一次感染能力而无复制能力的慢病毒载体。目前慢病毒载体已从两质粒系统发展到四质粒系统，安全性不断提高。目前常用...
我们都知道目前制备CART是体外培养,成本高耗时久,今天学习8月底Blood发表的一篇文章,介绍了一种VivoVec™的技术,这是一种利用慢病毒载体在体内生成嵌合抗原受体(CAR) T细胞的方法,目的是克服目前CART细胞疗法在成本和制造复杂性方面的障碍。 VivoVec™平台是一种慢...
慢病毒载体作为CAR转导T细胞的载体,是CAR-T细胞生产过程中的关键原料,对实现大规模生产、缩短生产周期具有重要意义。 01慢病毒载体和CAR-T 慢病毒载体是一种源于人类免疫缺陷病毒(HIV)的基因载体。在构建慢病毒载体时,为了避免产生有复制能力的病毒,会把HIV-1基因组分装与不同的质粒中,再共转染细胞,获得只有一次感染...
通过慢病毒载体构建 CAR-T 细胞在某些方面与 γ-逆转录病毒载体相似。将重组病毒基因组包装成病毒颗粒需要病毒基因 gag、pol 和 env 的伴随表达,它们分别编码病毒衣壳蛋白,复制酶和包膜糖蛋白,且以不含任何包装信号的异源亚基因组辅助质粒的反式方式存在。除 gag、pol 和 env 之外,慢病毒载体还需要反式激活因子 ...
CAR-T细胞基因转导具有一定的挑战性,慢病毒载体、逆转录病毒载体、转座子和 mRNA 电穿孔技术是较为常见的转导方法,这些技术的进步赋予 T 细胞新的生命力,实现了CAR-T对靶细胞高、精、准的持久杀伤,极大地提高了肿瘤特异性 T 细胞的临床治疗效果。慢病毒载体(Lentivirus,LV)因其宿主范围广、目的基因表达稳...
病毒载体 用于体内制造CAR-T细胞的主要病毒类型包括慢病毒、逆转录病毒和腺相关病毒(AAV)。 Pfeiffer等人首次通过注射靶向CD8+ T细胞的慢病毒载体(LV)来递送CD19-CAR,直接在体内制造CAR-T细胞。Michels等人(VivoVec)开发了抗CD3的scFv修饰的LV,用于在体内CD3+ T细胞...
慢病毒载体作为CAR转导T细胞的载体,是CAR-T细胞生产过程中的关键原料,对实现大规模生产、缩短生产周期具有重要意义。 01 慢病毒载体和CAR-T 慢病毒载体是一种源于人类免疫缺陷病毒(HIV)的基因载体。在构建慢病毒载体时,为了避免产生有复制能力的病毒,会把HIV-1基因组分装与不同的质粒中,再共转染细胞,获得只有一次感...
在CAR-T、CAR-NK细胞制备过程中,通常选择借助病毒载体将特定CAR基因转导至T细胞或者NK细胞中,慢病毒载体是目前的热门选择。为了将CAR基因高效导入目标细胞中,高转导效率是关键,而病毒滴度在很大程度上决定了转导效率的高低,因此高质量的慢病毒对CAR-T、CAR-NK细胞制备也是非常重要的。
基因递送载体作为CAR-T生产制备的核心环节,其质量对细胞产品及其治疗效果具有直接的影响。虽然生产慢病毒载体的步骤并不复杂,但如何大规模生产符合cGMP要求的高质量慢病毒载体仍具有挑战性。 2022年3月22日,医麦课堂邀请到博腾生物细胞治疗工...