◆ Calcein AM/PI Double Staining Kit ×1盒 ◆ 肉×1块 做法 1. 将肉制成单细胞悬液;2. 加入Calcein AM/PI染色工作液,室温避光孵育15-20min;3. 流式细胞仪上机检测。仅需3步,就能让变质肉立即显形:为了让大家更直观地看清楚,咱们使用小鼠脾脏做了新鲜样本和4℃放置3天样本的对比实验。从实验结果...
Calcein AM本身无荧光,进入细胞后,被细胞中的内源性酯酶水解,生成具有强负电荷且不能通过细胞膜的极性分子Calcein,滞留在细胞内,Calcein可发出强绿色荧光(Ex/Em=490nm/515nm)。 由于死细胞缺乏酯酶,不能或很少能产生Calcein,仅活细胞会被染色为强绿色荧光,死细胞则不能被染色,或染色非常弱;而碘化丙啶(Propidium ...
细胞毒性检测法(Calcein-AM/PI双染法)是一种常用的细胞活力和毒性评估方法。其原理基于细胞膜的完整性和代谢活性两个关键指标。在实验中,通过使用两种荧光染料Calcein-AM和PI(Propidium Iodide),可以快速准确地评估细胞的状态。Calcein-AM是一种脂溶性的非荧光染料,可以穿过完整的细胞膜进入细胞内部。在细胞内,...
Calcein-AM/PI,活细胞/死细胞双染试剂盒Calcein, AM 是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成 Calcein,从而被滞留在细胞内,发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如 BCECF, AM 和 CFDA)相比,Calcein, AM 的细胞毒性很低。Calcein 的激发和发射波长分别为 490 ...
Calcein-AM/PI,活细胞/死细胞双染试剂盒染色步骤: 1、 用Trypsin-EDTA消化细胞。 2、 通过离心收集细胞(1,000 rpm,3 min)。 3、 去除上清液,加入PBS(-)制备细胞悬液(105 - 106 cells/ml为宜)。 4、 重复步骤2和步骤3数次以消除培养基中的酯酶活性。
Calcein-AM/PI细胞双染试剂盒内包含两种染料:Calcein-AM(钙黄绿素)和Propidium Iodide (PI,碘化丙啶)。该试剂盒可以在荧光显微镜下同时观察在同一个细胞培养皿中的活细胞和死细胞。Calcein-AM(钙黄绿素)可透过细胞膜,通过活细胞内的酯酶作用脱去AM基团,产生的Calcein (钙黄绿素) 会发出强绿色荧光,因此活细胞在...
Calcein-AM和PI检测细胞毒性/细胞活性/凋亡原理: Calcein-AM的疏水性较强,能够直接穿透活细胞的细胞膜,然后被细胞内的酯酶水解成Calcein(钙黄绿素),从而产生绿色荧光。 PI不能穿透活细胞的细胞膜,只能进入凋亡的细胞或死细胞的细胞核,产生红色荧光。因此可以用Calcein-AM和PI双染色来区分活细胞和死细胞,从而检测细胞...
◆Calcein AM/PI Double Staining Kit ×1盒 ◆肉×1块 做法 1. 将肉制成单细胞悬液; 2. 加入Calcein AM/PI染色工作液,室温避光孵育15-20min; 3. 流式细胞仪上机检测。 仅需3步,就能让变质肉立即显形: 脾脏中活细胞数量对比 为了让大家更直观地看清楚,咱们使用小鼠脾脏做了新鲜样本和4℃放置3天样本的...
Calcein -AM 的乙酸甲基酯亲脂性很高,使其可透 过细胞膜。尽管 Calcein -AM 本身并不是荧光分子,但通过活细胞内 的酯酶作用,Calcein -AM 能脱去 AM 基,产生的 Calcein 能发出强绿 色荧光(激发:490 nm,发射:515 nm)。因此 Calcein -AM 仅对活 细胞染色。另一方面,作为核染色染料的 PI 不能穿过活细胞的...
Calcein-AM/PI,活细胞/死细胞双染试剂盒染色方案: 1、制备1mM Calcein AM储备溶液。将200μL二甲基亚砜加入含有200μg Calcein AM粉末的试管中,并使用移液管涡旋溶解。将溶液储存在避光的地方,并尽快使用,以避免重复的冻融循环。 2、使用前将Calcein AM储备溶液和PI储备溶液置于室温。使用PBS制备工作溶液。