Calcein-AM/PI细胞活死双染技术,作为一种广泛应用的荧光染色方法,被用于清晰地区分活细胞与死细胞。Calcein-AM,作为一种可渗透细胞膜的非荧光前体,能在活细胞内经内源性酯酶转化为绿色荧光的Calcein,从而揭示细胞的活性状态。而丙啶碘(PI),一种红色荧光染料,仅能穿透死细胞的受损细胞膜,因此只对死细胞染色。
使用Calcein-AM和PI进行染色的步骤如下:首先,将细胞接种至96孔板中,并按照实验需求进行处理。随后,移除原有培养基,用PBS洗涤一遍。接着,将Calcein-AM和PI染色液稀释至1X浓度,并向96孔板中加入100μL染色液。在37℃培养箱中孵育30分钟后,用荧光显微镜观察染色结果。Calcein呈现绿色荧光,PI呈现红色荧光,而Ho...
Calcein-AM 的终浓度为 2 µmol/l,PI的终浓度为 4.5 µmol/l。 2.细胞染色 1) 染色 HeLa 细胞等贴壁细胞时,先用 Trypsin-EDTA 等消化细胞,制备成细胞悬液。 2) 将细胞悬液离心 3 分钟 (1,000 rpm)。 3) 去除上清液,加入 PBS 缓冲液,细胞数量调整至 10e5-10e6 个/ml。再用移液器充分混匀。
Calcein-AM/PI,活细胞/死细胞双染试剂盒使用方法:以 HeLa 细胞染色为例,请注意不同的细胞种类、不同浓度,有不同的观察条件。1. 染色工作液的配制 添加 2.5 µl Calcein-AM 储备液(4mM)和 12.5 µl PI(2mM)储备液至 5 ml PBS 中配制成染色溶液。Calcein-AM的终浓度为 2 µM,PI 的终...
Calcein,AM/PI活死细胞双染步骤👇🏻以HeLa 细胞染色为例,请注意不同的细胞种类、不同浓度,有不同的观察条件。根据细胞条件,摸索不同条件下的细胞贴壁情况和试剂浓度的配制等最佳条件。 1.染色溶液的配制 1)将C...
Calcein-AM/PI,活细胞/死细胞双染试剂盒染色方案: 1、制备1mM Calcein AM储备溶液。将200μL二甲基亚砜加入含有200μg Calcein AM粉末的试管中,并使用移液管涡旋溶解。将溶液储存在避光的地方,并尽快使用,以避免重复的冻融循环。 2、使用前将Calcein AM储备溶液和PI储备溶液置于室温。使用PBS制备工作溶液。
细胞毒性检测法(Calcein-AM/PI双染法)是一种常用的细胞活力和毒性评估方法。其原理基于细胞膜的完整性和代谢活性两个关键指标。在实验中,通过使用两种荧光染料Calcein-AM和PI(Propidium Iodide),可以快速准确地评估细胞的状态。 Calcein-AM是一种脂溶性的非荧光染料,可以穿过完整的细胞膜进入细胞内部。在细胞内,Calcei...
因此,Calcein-AM常常与死细胞荧光探针如碘化丙啶(PI)等联合使用,同时进行活细胞和死细胞的荧光双重染色。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)不能穿过活细胞的细胞膜,仅能穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核,并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光(Ex=535 nm, Em=617 nm),因此PI仅对死细胞染色。由于Calcein和PI-...
中文名称:Calcein-AM/PI,活细胞/死细胞双染试剂盒 英文名字:Calcein-AM/PI, Live/Dead Cell Double Staining Kit Biogradetech货号:B-CHK103-500T 规格:500T 保存建议:Calcein-AM/PI,活细胞/死细胞双染试剂盒保存:-20℃干燥避光 有效期一年。Calcein-AM/PI,活细胞/死细胞双染试剂盒常见问题:1、 该...
在细胞生物学研究中,Calcein AM/PI 双染是一种常用的检测细胞活性与凋亡的方法。合理设置对照组对于准确解读实验结果至关重要。一、对照组设置 活细胞对照组:仅用 Calcein AM 对正常培养且已知活力良好的细胞进行染色。该组细胞应呈现出强烈的绿色荧光,表明 Calcein AM 成功进入活细胞并被酯酶水解产生荧光,可用于...