细胞毒性检测法(Calcein-AM/PI双染法)是一种常用的细胞活力和毒性评估方法。其原理基于细胞膜的完整性和代谢活性两个关键指标。在实验中,通过使用两种荧光染料Calcein-AM和PI(Propidium Iodide),可以快速准确地评估细胞的状态。Calcein-AM是一种脂溶性的非荧光染料,可以穿过完整的细胞膜进入细胞内部。在细胞内,...
Calcein-AM/PI细胞活死双染技术,作为一种广泛应用的荧光染色方法,被用于清晰地区分活细胞与死细胞。Calcein-AM,作为一种可渗透细胞膜的非荧光前体,能在活细胞内经内源性酯酶转化为绿色荧光的Calcein,从而揭示细胞的活性状态。而丙啶碘(PI),一种红色荧光染料,仅能穿透死细胞的受损细胞膜,因此只对死细胞染色。
Calcein-AM 和 PI 最佳浓度根据不同的细胞种类而定,通过以下的操作,我们可以找到不同细胞染色试剂的最佳浓度。 1) 通过在 0.1%皂苷或 0.1-0.5%毛地黄皂苷中孵育 10 分钟或通过在 70%乙醇中孵育 30 分钟制备死细胞。 2) 用0.1-10 µM PI 溶液对死细胞染色,以便找到仅对细胞核染色而不对细胞质染色的 PI...
使用Calcein-AM和PI进行染色的步骤如下:首先,将细胞接种至96孔板中,并按照实验需求进行处理。随后,移除原有培养基,用PBS洗涤一遍。接着,将Calcein-AM和PI染色液稀释至1X浓度,并向96孔板中加入100μL染色液。在37℃培养箱中孵育30分钟后,用荧光显微镜观察染色结果。Calcein呈现绿色荧光,PI呈现红色荧光,而H...
Calcein-AM/PI,活细胞/死细胞双染试剂盒使用方法:以 HeLa 细胞染色为例,请注意不同的细胞种类、不同浓度,有不同的观察条件。1. 染色工作液的配制 添加 2.5 µl Calcein-AM 储备液(4mM)和 12.5 µl PI(2mM)储备液至 5 ml PBS 中配制成染色溶液。Calcein-AM的终浓度为 2 µM,PI 的终...
Calcein,AM/PI活死细胞双染步骤👇🏻以HeLa 细胞染色为例,请注意不同的细胞种类、不同浓度,有不同的观察条件。根据细胞条件,摸索不同条件下的细胞贴壁情况和试剂浓度的配制等最佳条件。 1.染色溶液的配制 1)将C...
细胞毒性检测法(Calcein-AM/PI双染法)是一种常用的细胞活力和毒性评估方法。其原理基于细胞膜的完整性和代谢活性两个关键指标。在实验中,通过使用两种荧光染料Calcein-AM和PI(Propidium Iodide),可以快速准确地评估细胞的状态。 Calcein-AM是一种脂溶性的非荧光染料,可以穿过完整的细胞膜进入细胞内部。在细胞内,Calcei...
Calcein-AM/PI,活细胞/死细胞双染试剂盒染色方案: 1、制备1mM Calcein AM储备溶液。将200μL二甲基亚砜加入含有200μg Calcein AM粉末的试管中,并使用移液管涡旋溶解。将溶液储存在避光的地方,并尽快使用,以避免重复的冻融循环。 2、使用前将Calcein AM储备溶液和PI储备溶液置于室温。使用PBS制备工作溶液。
Calcein-AM/PI,活细胞/死细胞双染试剂盒染色方案: 1、制备1mM Calcein AM储备溶液。将200μL二甲基亚砜加入含有200μg Calcein AM粉末的试管中,并使用移液管涡旋溶解。将溶液储存在避光的地方,并尽快使用,以避免重复的冻融循环。 2、使用前将Calcein AM储备溶液和PI储备溶液置于室温。使用PBS制备工作溶液。
Calcein-AM/PI,活细胞/死细胞双染试剂盒常见问题:1、 该试剂盒适用任何细胞类型?基本上适用于任何含酯酶活性的动物细胞。植物和细菌细胞因含有细胞壁,Calcein-AM不能进入因此无法染色。有可能对原生质体进行染色。2、 用相同浓度有可能对所有哺乳动物细胞进行染色?对所有细胞都用相同的浓度是很不合理的。Calcein-AM...