Foxp3的表达是Treg细胞身份的标志,采用RT-PCR技术和流式细胞术,可以鉴定Foxp3基因和蛋白的表达量。 2功能鉴定:肿瘤微环境中的Treg细胞,通过抑制T淋巴细胞的增殖和活化,从而抑制抗肿瘤免疫应答,采用Treg细胞和T淋巴细胞共培养体系,可以鉴定Treg细胞的免疫抑制功能。 本期,大家跟着小Q一起来学习Treg细胞的表型鉴定吧。
真核细胞RNA提取及RT-PCR 一、人骨髓细胞总RNA的提取(Trizol法提取) 目的: 1.掌握人骨髓细胞中总RNA提取的基本原理 2.熟悉Trizol法提取总RNA的原理和操作 原理: Trizol是一种新型总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞,再加入氯仿后形成两相,DNA与蛋白质存在于有机相,RNA保留于上层水相,将上层水样...
答:一般转染效率达到 50% 的话,一个 24 孔班板的细胞足够做 RT-PCR 和 Western 了,你可以做一个 6 孔板转染或 2 个 24 孔细胞转染.瞬时转染可以传代,但传代后所转染的细胞会越来越少.你传代的目的是什么?如果想稳定表达的话,你应该作稳定转染。 ...
单细胞RT-PCR表达量数据也可以差异分析 最近搜集整理单细胞研究的时候,看到于2015年发表在nature杂志的文章是:Single-cell analysis reveals a stem-cell program in human metastatic breast cancer cells ,蛮有意思的,居然是 Single-cell multiplex qPCR 数据哦! 研究者们首先通过流式预先把细胞分类,分成:basal/stem...
通过荧光信号检测用特异性引物以及荧光染料扩增目的基因,通过荧光信号检测DNA水平水平PCR Polymerase chain reaction 用特异性引物扩增目的基因,通过用特异性引物扩增目的基因,通过DNA凝胶电泳等方式检测凝胶电泳等方式检测DNA水平水平RT-PCR/RT-qPCRtranscriptiontranscriptionAAAAAAAAAAmRNAmRNAReverse transcriptioncDNAPCR/qPCR...
真核细胞RNA提取及RT-PCR 一、人骨髓细胞总RNA的提取（Trizol法提取）目的：1.掌握人骨髓细胞中总RNA提取的基本原理 2.熟悉Trizol法提取总RNA的原理和操作 原理:Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞，再加入氯仿后形成两相，DNA与蛋白质存在于有机相，RNA保留于上层水相，将上层...
RT-PCR实验 A、RNA逆转录成cDNA(PrimeScriptII 1st Strand cDNA Synthesis Kit): 1、在灭菌0.1%DEPC浸泡过夜的1.5ml离心管中配制下列混合液 Oligo dT Primer(50uM)1ul dNTP mixture (10mMeach) 1ul RNA模板0.5ug～5ug(根据说明书要求以及RNA浓度计算得到) RNase Free dH2O适量至总体积为10ul 2、65℃保温5mi...
在剩余的35份NGS阳性样本中,有32份(91.4%)为RT-PCR阳性。RT-PCR未鉴定出的3种RET融合基因分别为AKAP13(35)-RET(12)、KIF5B(24)-RET(9)和KIF5B(24)-RET(11)。3例均为AC,其中2例经手术切除,1例经粗针穿刺活检确诊,手术切除标本均含有印戒细胞或沙砾体。3例均为FISH阳性,均表现为典型的断裂-分离模式...
本实验借助eppendorf cMaster RTplus PCR系统,首次通过检测mRNA的存在证实单细胞草履虫Paramecium primaurelia的两种表面抗原的同时表达。这个实验第一次在RNA水平上证实了表面抗原互斥表达(mutual exclusion expression)的一个例外。这个实验是通过两步法多重RT-PCR来实现的。
用RT—PCR检测犬外周血液单核细胞中犬瘟热病毒核衣壳蛋… 摘要:犬瘟热病毒(CDV)是一种高度传染性的病毒,对犬类健康构成严重威胁。本研究旨在利用RT-PCR技术检测犬外周血液单核细胞(PBMCs)中CDV核衣壳蛋白基因的表达,以期为犬瘟热的早期诊断和防控提供新的方法。通过对犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因的特异性引物设计,本研究...