以RT--PCR方法检测胃癌细胞中四种细胞因子 程德春 【摘要】目的以RT—PCR方法检测胃癌细胞中四种细胞因子.方法采用Trizol试 荆提取细 胞中总RNA,采用RT—I'CR法扩增IL一2,IL一4,IFN一^r,TNF--p的eDNA,扩增 产物经电泳分离后, 用凝胶成像系统照相,检测其相对表达量.结果RT…PCR产物经电泳后,IL一2,lL 一4...
我们建立了一种半定量 逆转录聚合酶链反应 ( sqR T2PCR) 方法 ,检测了动物 心脏移植模型中 Th1 型细胞因子 IL22 及 Th2 型细 胞因子 IL24 mRNA 的表达水平的变化并获得较好 结果 ,为细胞因子表达 、 其他基因 mRNA 表达及其 变化的研究 ,建立了一种快速 、 灵敏和有效的检测方 法。 [7 ] 1 材料...
1、RT-PCR要领检测细胞信号传导按捺因子-1SOCS-1 mRNA在髓性白杨海平,戴敏,周红升,黄亮,张东华【关键词】RT-PR;SS-1RNA;白血病DetetinfSS-1RNAExpressinbyRT-PRinthePatientsithyelidLeukeiaKeyrdsRT-PR;SS-1RNA;leukeia细胞因子信号传导按捺卵白(suppressrfytkinesignaling,SS)是近几年才创造的一类新型免疫卵...
答案 是容易降解。不过你用的方法也没有可比性。RT-PCR的敏感性和常用检测蛋白的方法的敏感性不是一个数量级的。理论上RT-PCR可以检测到极低浓度(一个分子),而western或者ELISA需要的目标分子量就很大。所以你测不到,并不是所没有,而是低于检出的阈值而已。相关推荐 1细胞因子IL-12容易降解吗为什么RT-PCR可以检...
实时定量RT-PCR广泛应用于基因表达分析、病原体检测、基因突变研究等领域。 样品准备:从待测样品中提取RNA。样品可以是细胞、组织或生物体液等。提取RNA时,需要注意防止RNA酶的污染,以保证RNA的完整性和纯度。 反转录:提取的RNA经过适当处理后,通过反转录酶的作用,将RNA反转录成cDNA。反转录过程中,可以使用随机引物...
摘要: 目的:建立一种客观、敏感的检测IL-2/IL-4细胞因子基因表达变化的方法.方法:采用TRIzol试剂提取免疫排斥/免疫耐受大鼠脾脏组织总RNA,分光光度计法定量.取2μg总RNA,采用RT-PCR法逆转录-扩增IL-2、IL-4和内参照β-actm cDNA,扩增产物经电泳分离后,用凝胶图像分析仪照相和扫描分析,检测... 查看全部>> ...
RT PCR 方法检测细胞中p53基因的特异表达预习报告 1310301315 张铨 一、RT PCR技术 1.基本原理 聚合酶链反应(PCR)技术是利用DNA聚合酶在体外条件F．催化一对特异引物之间特异DNA片段合成的基因扩增技术。PCR包括三个基本过程：(1)变性，在高温度条件下使双链模板DNA变性、解链，成为两条单链DNA；(2)退火，在较...
应用RT-PCR方法,体外扩增获得人IL-6,IL-10,IL-13和SCF膜外区蛋白质编码序列.又运用基因重组手段,将这些基因序列分别插入到表达性载体PBV220中,转化大肠肝菌DH5α,经过筛选和鉴定,获得了上述细胞因子膜外区cDNA克隆.SDS-PAGE和生物学活性测定证实:IL-6,IL-10和IL-13已在大肠肝菌中得到表达,尤其是IL-6获得了...
为建立及应用定量检测猪促炎细胞因子mRNA表达水平的方法,从分子水平研究脑心肌炎病毒(EMCV)的致病机制,分别构建含有猪促炎细胞因子IL-1β,IL-6,TNF-α以及管家基因β-actin基因片段的重组质粒标准品,建立了检测IL-1β/β-actin,IL-6/β-actin,TNF-α/β-actin的多重TaqMan real-time PCR检测方法.标准曲线的...
RT-PCR检测人膀胱上皮细胞双功能氧化酶表达